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联硕生物
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低温
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1瓶
SuperScript™ III 第一链合成 SuperMix 是一种优化的 SuperMix 制剂,用于从纯化的 poly(A)+ 或总 RNA 进行第一链 cDNA 合成。使用该系统可检测 100 bp 至 >12 kb 的 RNA 靶标。起始材料量的范围为 0.1 pg 至 5 µg 总 RNA。
使用 SuperScript™ III 第一链合成 SuperMix
该试剂盒包括 SuperScript™ III/RNaseOUT™ 酶混合物、2X 第一链反应混合物和退火缓冲液。SuperScript™ III 反转录酶(酶混合物随附)是一款 M-MLV 反转录酶,其经过基因改造以降低 RNase H 活性和提高热稳定性。该酶可用于在 45–55°C 温度范围内合成 cDNA,相对于其他反转录酶,具有更高的特异性和 cDNA 得率以及更多的全长产物。由于 SuperScript™ III RT 不会受到核糖体和转运 RNA 的显著抑制,因此可用于从总 RNA 合成 cDNA。RNaseOUT™ 重组 RNase 抑制剂随附在酶混合物中,可防止靶标 RNA 因核糖核酸酶污染而降解。2X 第一链反应混合物的缓冲液配方中加入了 10 mM MgCl2 和各 1 mM 的 dNTP,并针对 cDNA 第一链合成进行了优化。退火缓冲液用于初始模板-引物退火步骤。另提供单管形式的 oligo(dT)20 和随机六聚体。可使用总 RNA 或 poly(A)+选定 RNA(由 oligo(dT)、随机引物或基因特异性引物引发)进行 cDNA 合成。
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文献和实验性,因而即使是最具挑战性的模板也可以进行有效的RT-PCR.。 通过SuperMix形式快速合成cDNA SuperScript™ III First—Strand Synthesis SuperMix将所有进行强大的、灵敏的第一链cDNA合成所必须的组分组合成快速、易于使用的 SuperMix形式。SuperMix形式包含 2x RT缓冲反应混合物、dNTPs、MgCl2、 以及由SuperScript™ III RT和RNaseOUT™.组成的酶混合物。也提供优化的退火缓冲
性,更高的cDNA产量以及更多的全长产物。Thermo-X™ RT克隆自一种嗜热真细菌,提供高达70℃的热稳定性,因而即使是最具挑战性的模板也可以进行有效的RT-PCR.。 通过SuperMix形式快速合成cDNA SuperScript™ III First—Strand Synthesis SuperMix将所有进行强大的、灵敏的第一链cDNA合成所必须的组分组合成快速、易于使用的 SuperMix形式。SuperMix形式包含 2x RT缓冲反应混合物、dNTPs、MgCl
BRL合成,脱盐沉淀,用无菌水稀释到10mM。PCR用的试剂,包括Taq DNA聚合酶,PCR SUPERMIX,和ELONGASETM扩增系统都来自Life Technologies(即现在的Invitrogen公司)。ELONGASE™酶混合物包括Taq DNA聚合酶和火球菌GB-D(Pyrococcus species GB-D)聚合酶。如果PCR单独使用Taq DNA聚合酶,5'RACE系统版本2还带有用于UDG克隆的引物。 表1 引物的序列
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