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过敏毒素C5a放免药盒操作说明
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钰博生物
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酶联免疫
科研
血清/组织/尿液
过敏毒素C5a放免药盒操作说明书 C5a(HY-10233) RIA KIT C5a是补体C5的活化产物,是一个由74个氨基酸组成的糖肽,分子量为11200,PI为8.5-8.7,与C3a、C4a一起共称为过敏毒素。C5a是人体最强的过敏毒素,在补体系统被激活过程中,C5被分解为C5a和C5b,其中C5b继续参与膜攻击复合物的形成,而C5a以游离形式存在,独自发挥作用。它可刺激中性粒细胞做定向移动,能诱导多种急性炎症反应;可以通过对不同凝血因子及凝血酶的调节,来实现对凝血系统的调节。C5a是连接固有免疫应答和获得性免疫应答的成分之一,可以通过对各种细胞因子的调节影响免疫系统。药盒组成:(常温运输,4℃保存)1、缓冲液(PBS)1瓶。用时每瓶加蒸馏水至50ml.. 2、 PR分离剂(第二抗体)3、 C5a抗体1瓶:用前充分摇匀4、125I- C5a 1瓶:5、C5a标准品5瓶,浓度为10、20、40、80、160ng/ml过敏毒素C5a放免药盒操作说明书 样品收集: 1、血清采集:取静脉血2ml,注入试管待凝固后,4℃3000rpm离心,10min,分离血清。放-20℃,样品可保存2个月,在-70℃以下可存放半年。测定前使样本置于室温或冷水中复融,再次4℃3000rpm离心,5 min,取上清测定 2、组织样品的处理: 取组织称重0.3~0.5g,用新华滤纸吸干组织液和血液,加生理盐水1毫升(含0.05mol/l醋酸20ul),进行研磨,使组织充分粉碎,以3000r/min速度离心10min取上清,沉淀加生理盐水0.5毫升(含0.05mol/l醋酸20ul),以3000r/min速度离心10min取上清,两次上清合并,用0.05mol的NaOH25ul(调PH值7.4左右)测定方法:(非平衡法加样) C5a RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 100 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放24小时 ———————————————————————————— 125I- C5a 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混匀,室温15分钟, 3500 转/分 4℃离心20分钟,吸弃上清液,测定沉淀cpm数。
结果计算: 以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值, 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。过敏毒素C5a放免药盒操作说明书注意事项: 本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 本月分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)本试剂盒主要技术指标:1. NSB:7%。2. 灵敏度:<1ng/ml。3. 标准曲线范围:10~160ng/ml。4. 批内变异系数:CVw<7.0 %。5. 批间变异系数:CVw < 12.0% 。6. 正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 32±12ng/ml(n=25)。 本次药盒参考数据: —————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 —————————————————————————————— CPM —————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————— 过敏毒素C5a放免药盒操作说明书其它产品:yb-E10508 人EJ抗体/抗甘氨酰tRNA合成酶抗体(EJ/GlyRS)ELISA试剂盒 EJ human antibody / anti- glycyl tRNA synthetase antibody (EJ / GlyRS) ELISA kityb-E10509 人低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISA试剂盒 Human LDL immune complexes (LDL-IC) ELISA Kityb-E10510 人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒 Human anti- proliferating cell nuclear antigen antibody (PCNA) ELISA kityb-E10511 人抗IgE受体抗体ELISA试剂盒 Human anti- IgE receptor antibody ELISA kityb-E10512 人抗IVIgG抗体ELISA试剂盒 Human anti IVIgG antibody ELISA kityb-E10513 人抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒 Human anti- myocardial antibodies (AMA) ELISA kityb-E10514 人抗甲状腺微粒体抗体(ATMA/TMAB)ELISA试剂盒 Anti- human thyroid microsomal antibody (ATMA / TMAB) ELISA Kityb-E10515 人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒 Human anti- thyroglobulin antibody (ATGA / TGAB) ELISA kityb-E10516 人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒 Human glutamic acid decarboxylase autoantibodies (GAD-Ab) ELISA kityb-E10517 人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒 Human anti -platelet antibodies IgG / M / A (PA-IgG/M/A) ELISA Kityb-E10518 人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA试剂盒 Human anti- lymphocyte globulin (ALG) ELISA kityb-E10519 人抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒 Human antitrypsin (AT) ELISA Kityb-E10520 人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)ELISA试剂盒 Human anti- ribosomal P protein antibody (ARPA / Rib-P) ELISA Kityb-E10521 人抗骨骼肌抗体(ASA)ELISA试剂盒 Anti- human skeletal muscle antibody (ASA) ELISA Kityb-E10522 人甲状腺抗体(TAb)ELISA试剂盒 Thyroid antibodies (TAb) ELISA kityb-E10523 人胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒 Human islet cell antibodies (ICA) ELISA Kityb-E10524 人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA试剂盒 Human anti- salivary duct tissue antibodies (SDA) ELISA kit
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