过敏毒素C5a放免药盒操作说明书

过敏毒素C5a放免药盒操作说明书
C5a（HY-10233） RIA KIT
C5a是补体C5的活化产物，是一个由74个氨基酸组成的糖肽，分子量为11200，PI为8.5-8.7，与C3a、C4a一起共称为过敏毒素。C5a是人体最强的过敏毒素，在补体系统被激活过程中，C5被分解为C5a和C5b,其中C5b继续参与膜攻击复合物的形成，而C5a以游离形式存在，独自发挥作用。它可刺激中性粒细胞做定向移动，能诱导多种急性炎症反应；可以通过对不同凝血因子及凝血酶的调节，来实现对凝血系统的调节。C5a是连接固有免疫应答和获得性免疫应答的成分之一，可以通过对各种细胞因子的调节影响免疫系统。
过敏毒素C5a放免药盒操作说明书药盒组成：（常温运输，4℃保存）1、缓冲液（PBS）1瓶。用时每瓶加蒸馏水至50ml..
2、 PR分离剂（第二抗体）
3、 C5a抗体1瓶：用前充分摇匀
4、¹²⁵I- C5a 1瓶：
5、C5a标准品5瓶，浓度为10、20、40、80、160ng/ml
过敏毒素C5a放免药盒操作说明书样品收集：
1、血清采集：取静脉血2ml，注入试管待凝固后，4℃3000rpm离心，10min，分离血清。放-20℃，样品可保存2个月，在-70℃以下可存放半年。测定前使样本置于室温或冷水中复融，再次4℃3000rpm离心，5 min，取上清测定
2、组织样品的处理： 取组织称重0.3~0.5g，用新华滤纸吸干组织液和血液，加生理盐水1毫升（含0.05mol/l醋酸20ul），进行研磨，使组织充分粉碎，以3000r/min速度离心10min取上清，沉淀加生理盐水0.5毫升（含0.05mol/l醋酸20ul），以3000r/min速度离心10min取上清，两次上清合并，用0.05mol的NaOH25ul（调PH值7.4左右）
测定方法：（非平衡法加样）
C5a RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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¹²⁵I- C5a 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温15分钟， 3500 转/分 4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。

过敏毒素C5a放免药盒操作说明书结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
注意事项：
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
本试剂盒主要技术指标：
1． NSB：7%。
2． 灵敏度：<1ng/ml。
3． 标准曲线范围：10~160ng/ml。
4． 批内变异系数：CVw<7.0 %。
5． 批间变异系数：CVw < 12.0% 。
6． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
32±12ng/ml(n=25)。
本次药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
—————————————————————————————— 中文名称：人阿米巴(Amebiasis)ELISA试剂盒价格96t/48t 英文名称：Human Amebiasis ELISAkit
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