TH糖蛋白放射免疫分析药盒说明书
THP (HY-138) RIA KIT
TH糖蛋白(以下简称THP)是一种肾脏的特异蛋白,对调节人体水分的平衡起重要作用。THP由肾脏亨氏升支及远端曲管上皮细胞内高尔基体产生,分子量为70000-100000,每个亚单位含有50个半胱氨酸残基,极易形成聚合体,聚合体解聚后不影响THP的免疫活性。
本药盒主要用于测定血清和尿液中THP的含量的测定,其指标为诊断急性和慢性肾功能衰竭、肾小球疾病、狼疮性肾病及肾脏移植手术预后提供重要依据。
测定原理
本方法采用竞争放射免疫分析法,即标准或待测样品中的THP和125I-THP共同与限量的特异性糖蛋白抗体在适宜的条件下进行结合反应。当非标记THP含量越高,标记THP与抗体形成复合物越少;非标记THP的含量越低,标记THP与抗体形成复合物越多。抗原-抗体复合物用免疫分离剂沉淀下来,测定沉淀物的放射性计数。可绘制出标准曲线,从曲线上即可查出被检样品中THP含量。(数据可由计算机自动处理)
TH糖蛋白放射免疫分析药盒说明书药盒组成:
1、THP标记1瓶 。
2、THP抗体1瓶。
3、分离剂(第二抗体)1瓶。
4、THP标准品7瓶:0、50、100、200、400、800、1600ng/ml;液体直接使用。
以上各组试剂均应摇匀使用。
样品处理
1、 血样处理:取静脉采血,分离血清。(2-8)℃放置可保存7天,若冰冻保存,可放置四周。避免反复冻融。脂血或溶血样品影响测定结果。
2、尿样处理:受试者24小时尿收集在预先加有10ml甲苯的容器中,测其总量ml,混匀,取2ml加盖密封后置4℃储存,存放时间不要超过10天,用前摇匀,取出适量尿样用生理盐水稀释到尿样40倍,待加样用。
测定方法:
THP RIA 加液程序 (单位: ul )
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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标准品S0 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I-THP 100 100 100 100 100
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摇匀37℃ 温育1小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置15分钟后,3500转/分离心15分钟 ,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:
以N/T、B/T计算NBS、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值。或由自动γ-计数器预先编制程序,直 接 给出有关参数,标准曲线及样品浓度。
TH糖蛋白放射免疫分析药盒说明书注意事项
本月药盒抗体每瓶用7.5ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 (如不填写,100T药盒加10ml生理盐水溶解,50T
药盒加5ml溶解)
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
主要技术指标:
1、灵敏度:≤20ng/ml。
2、测定范围:50-1600ng/ml。
3、批内变异系数:CVw<10 %,
批间变异系数:CVw < 15% 。
4、正常参考值:各实验室应根据自己的条件建立自己的正常值范围
血清:107-379.6ng/ml(n=80) 尿:12.4-61.6mg/ml/24小时
本月药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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