TH糖蛋白放射免疫分析药盒说明书

TH糖蛋白放射免疫分析药盒说明书

THP （HY-138） RIA KIT

TH糖蛋白（以下简称THP）是一种肾脏的特异蛋白，对调节人体水分的平衡起重要作用。THP由肾脏亨氏升支及远端曲管上皮细胞内高尔基体产生，分子量为70000-100000，每个亚单位含有50个半胱氨酸残基，极易形成聚合体，聚合体解聚后不影响THP的免疫活性。

本药盒主要用于测定血清和尿液中THP的含量的测定，其指标为诊断急性和慢性肾功能衰竭、肾小球疾病、狼疮性肾病及肾脏移植手术预后提供重要依据。

测定原理

本方法采用竞争放射免疫分析法，即标准或待测样品中的THP和125I-THP共同与限量的特异性糖蛋白抗体在适宜的条件下进行结合反应。当非标记THP含量越高，标记THP与抗体形成复合物越少；非标记THP的含量越低，标记THP与抗体形成复合物越多。抗原-抗体复合物用免疫分离剂沉淀下来，测定沉淀物的放射性计数。可绘制出标准曲线，从曲线上即可查出被检样品中THP含量。（数据可由计算机自动处理）

TH糖蛋白放射免疫分析药盒说明书药盒组成：

1、THP标记1瓶 。

2、THP抗体1瓶。

3、分离剂（第二抗体）1瓶。

4、THP标准品7瓶：0、50、100、200、400、800、1600ng/ml；液体直接使用。

以上各组试剂均应摇匀使用。

样品处理

1、 血样处理：取静脉采血，分离血清。（2－8）℃放置可保存7天，若冰冻保存，可放置四周。避免反复冻融。脂血或溶血样品影响测定结果。

2、尿样处理：受试者24小时尿收集在预先加有10ml甲苯的容器中，测其总量ml，混匀，取2ml加盖密封后置4℃储存，存放时间不要超过10天，用前摇匀，取出适量尿样用生理盐水稀释到尿样40倍，待加样用。

测定方法：

THP RIA 加液程序 （单位： ul ）

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试 剂 T NSB S₀ S₁~S₆ 样 品

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标准品S0 —— 200 100 —— ——

标 准 品 —— —— —— 100 ——

样 品 —— —— —— —— 100

抗 体 —— —— 100 100 100

¹²⁵I-THP 100 100 100 100 100

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摇匀37℃ 温育1小时

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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温放置15分钟后，3500转/分离心15分钟 ，弃上清液，测沉淀cpm数。

结果计算：

以N/T、B/T计算NBS、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值。或由自动γ-计数器预先编制程序，直 接 给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

TH糖蛋白放射免疫分析药盒说明书注意事项

本月药盒抗体每瓶用7.5ml缓冲液稀释

本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释 (如不填写，100T药盒加10ml生理盐水溶解，50T

药盒加5ml溶解)

本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

主要技术指标：

1、灵敏度：≤20ng/ml。

2、测定范围：50-1600ng/ml。

3、批内变异系数：CVw<10 %,

批间变异系数：CVw < 15% 。

4、正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常值范围

血清：107-379.6ng/ml(n=80) 尿：12.4-61.6mg/ml/24小时

本月药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅ S₆

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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