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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 宿主:
NA
- 适应物种:
Human;Mouse;Rat;Sheep
- 克隆性:
单克隆
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文献和实验表达,如扩增标志基因谷氨酰胺合成酶GS,可被MSX(L-methionine sulphosimine)所抑制,GS显性选择标志可在多种类型细胞中表达,通过大剂量一次性筛选,可获得高拷贝扩增。扩增标志基因可分别位于重、轻链载体上,通过共转染来获得抗体,也可将重、轻链串联于一个表达载体上,此时基因顺序很重要,因为下游启动子可被上游启动子通读而产生闭合现象。 2.大肠杆菌中表达 大肠杆菌虽没有糖基化修饰的功能,但是,现在已经证实表达的抗体片段如Fab、ScFv、VH能正确折叠及装配成具有
编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。neo基因为非扩增性选择基因,不影响目的基因拷贝数。G418筛选系统已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用,与之作用原理相似的还有潮霉素和嘌呤霉素筛选系统。 而在生物医药领域中主要是利用CHO细胞的GS或DHFR 筛选系统进行抗体药物、重组蛋白等的生产。 CHO表达系统 CHO表达系统是目前应用最广泛的真核表达系统之一,与其他表达系统相比
形成过程很复杂,目前放大体积不超过20 L 。但琼脂糖凝胶无毒性,具有较大的空隙,可以允许大分子物质自由扩散,因此该法特别适用于蛋白产物的连续生产。有人曾用琼脂糖包埋杂交瘤细胞和淋巴细胞生产单克隆抗体和白细胞介素 。1. 2. 3 血纤维蛋白将动物细胞与血纤维蛋白原混合,然后加入凝血酶。凝血酶将血纤维蛋白原转化为不溶性的血纤维蛋白,将动物细胞固定在其中。血纤维蛋白可以促进细胞贴壁,因此两种类型的细胞都适于培养。而且基质高度多孔,允许大分子物质的自由扩散。但机械强度差,对剪切力很敏感。1. 3 中空
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