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Cas9核酸内切酶是用于体外CRISPR/Cas研究的整合解决方案的组成部分之一。利用该试剂盒可以对大基因或大的DNA片段进行体外克隆,而不受常用限制性酶切或PCR忠实性的限制。允许用户根据目标序列对DNA进行单点或多点的切割。
- 可自定义的外切酶特异性
- 比限制性酶更好的选择性和灵活性
- 整合了免费使用的基于网络的向导RNA设计工具以配合体外克隆应用
SureGuide gRNA Synthesis Kits 向导RNA合成试剂盒 (Cat. 5190-7718)
SureGuide 向导RNA合成试剂盒是体外CRISPR/Cas研究的一个整合的解决方案。使用该试剂盒可以用来生成高质量的向导RNA,通过结合SureGuide Cas 9核酸酶来对DNA进行准确的定向切割。SureGuide向导RNA试剂盒可以节约你从计划到实验的时间,并免除了你自行构建CRISPR/Cas系统的费用。
- 2小时内完成向导RNA的合成和纯化
- 经广泛验证的合成系统,在查找问题时只需关注你的实验,而不用担心问题出在试剂上
- 酶和试剂均经优化,能与SureGuide Cas9核酸酶最好的结合
SureDesign Custom Design Tool 订制设计工具
SureDesign 是一个基于网络的应用,它允许您最大化安捷伦SurePrint 寡核苷酸生产技术的灵活性,以生产客户订制的芯片、FISH探针以及二代测序的靶向捕获文库。SureDesign免费面向所有注册用户,允许您针对您的研究需求设计独特的试验,或利用SureDesign所支持的不同应用于来交互验证您的实验。
其它包装规格请咨询,或访问:https://www.genomics.agilent.com
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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具,今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作,仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒,如下图所示: 酶切系统 37 ℃, 3 hr;Run 1% gel,回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端,以利于下游 oligo 退火产物的连接;酶切时请充分,且绝对不能加 CIP 处理
手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
一、CRISPR-Cas 系统简介图 1 CRISPR-Cas9 系统介绍CRISPR-Cas9 系统是一种被广泛运用的基因组编辑工具,它来源于细菌的适应性免疫系统。CRISPR-Cas9 系统包括:Cas9 酶和一个向导 RNA。 向导 RNA 作用是引导 cas9 到基因组的特异性位点上切割。如图 1 所示。目前为止,CRISPR-Cas9 系统主要有两方面应用: 基因敲除和基因敲入。基因敲除时, 一旦 DNA 的双链断裂反应(DSB)被 Cas9 切割诱导发生, 细胞会启动 NHEJ
,也使得 CRIPSR 的机理逐渐清晰。越来越多的不同菌中的 CRISPR 系统被发现,随后研究者们根据他们降解外源的遗传物质的方法,将他们分为了三类。如图中的 Type I and Type III.这两套系统由于参与的蛋白众多,需要几个复合物共同作用才能发挥作用,使得它不宜操作和改造。但其他几个系统的发现的过程也是非常值得一讲的,都是非常漂亮的工作。(mark 先,待补充) 四、窗户纸就快捅破了-Cas9 很多同学知道 Cas9, 并不知道还有 Cas1,Cas2,Cas












