TEM电镜石蜡切片免疫组织化学HRP酶联DAB直接检测试剂盒

进阶：6 年免疫组化经验总结

；   2、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议用单克隆抗体看看；   3、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色；   4、非特异性组分与抗体结合，这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果；   5、缩短 DAB 孵育时间或降低 DAB 浓度/过氧化氢浓度等；   6、适当增加 PBS 冲洗次数和浸洗时间，在一抗、二抗或 SP 孵育之后的浸洗尤为重要；   7、防止标本染色过程中

常用的免疫酶染色方法

的第 3、4 步并为1步，用PAP复合物代替。 *PAP是离体制备的复合物( HRP--抗 HRP)。 *显色与酶桥法相同，PAP复合物中的过氧化物酶催化底物水解，形成不溶性终产物。 PAP法评价 *PAP法比直接法、间接法、酶桥法更敏感。特别适用于石蜡切片中微量抗原和抗原性减弱抗原的检测。 -缺点：步骤较多，时间较长，不适用于临床常规检查。 *由于常做石蜡切片，故可用于回顾性研究。 (二) 亲和组织化学法 *是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础。 *这种方法敏感

免疫组化常见问题与回答集锦

一、石蜡切片和冰冻切片的比较？ 1.要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片；但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。 2.冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散；切片厚度较石蜡的厚，做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时，目录上都写着做什么样的切片，如果它写着只能做冰冻，就不能做石蜡，如写