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登革热检测试剂

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    登革热快速检测试剂盒是用来定量检测人血清、血浆和全血中的登革热病毒IgM和IgG抗体的方法。这方法能用来鉴别初次和二次感染。它仅能用来检测具有临床登革热症状的病人的样本。结果是假定阳性的,必须经病毒分离、双份血清分析、免疫组织化学检测抗原或病毒核酸检测证实有登革热病毒感染。
    原理:
    在处理病人样本时,登革热特异性IgM和IgG抗体和包埋在横过盒膜的两条线上的抗-人IgM和IgG抗体相结合。胶态金复合物包含重组登革热1~4型抗原被病人的IgM和IgG捕获而显现出粉红色的线。设定一个对照程序来指示方法操作正确。
    试剂盒组成:
    每个试剂盒包括下面的东西,数量足够能完成包装袋标签上标明的测试份数。
    •25小包。每包里面有一个试剂盒和一个10µL的MicroSafe®移液管。
    •1份使用说明书。
    •1管3ml的缓冲液(含有0.1% Proclin)
    必要的但不提供的材料
    计时器
    一般程序
    MicroSafe®移液管的操作方法
    MicroSafe®移液管能用来吸全血、血浆或血清。
    在吸液时请严格遵照下面的使用说明(图1):
    1.水平地拿着移液管。
    2.吸液时,移液管的尖端和测试样本接触(见下图1)。
    3.轻轻地挤泡排出样本。
    注意:在吸液时,不要挤泡;它会自动充满的。
    样本收集和准备:
    1.静脉血在室温下(20~25ºC)会凝结成块,然后根据全国临床实验标准委员会(NCCLS)(收集诊断静脉血的认可标准程序,H3-A4, 1998)进行离心。
    血清应尽快分离并冷藏(2~8ºC)或是冷冻(-20ºC),如果在两天内不试验的话,应冷冻在更低的温度下。黄疸血清、有溶血的、脂血的或是有细菌生长的血清都不推荐使用
    2.不推荐使用自我解冻的致冷机来贮存样本,因为它能引起样本经过冻融周期和降低抗体水平,因此产生假结果。
    3.指端血采集后要马上测试。NCCLS建议含有EDTA或肝素作为抗凝剂的全血可以不经离心就立即使用,或者也可以在2~8ºC放上72小时(血样处理加工的认可标准程序,H18-A2, 1999)
    4.发热开始后样本的采集时间决定了试验的准确度。在发热开始后的6~14天采得的样本能得到最佳的结果。
    测试程序:
    注意:在开始实验前确保所有的试剂平衡至室温(20-25°C)。
    要用时,才从袋内拿出试剂盒和MicroSafe®移液管。
    . 用微量移液器或是提供的MicroSafe®移液管在圆孔内加入10µL的全血、血清或血浆。
    . 让样品完全吸收融入圆孔里的样品垫内。
    . 在方孔上方1cm处垂直地拿着缓冲瓶。
    . 在试剂盒底部的方孔内加入2滴缓冲液。
    . 加缓冲液的刚刚15分钟后读结果。
    . 在测试区域内出现粉红色线的痕迹就表明阳性结果。
    . 超过15分钟后读取的结果将认为是无效的,必须要重做

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