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杰美基因
- 库存:
大量
- 规格:
10毫升
供应试剂主要类别:细胞技术、分子技术、蛋白化学、免疫抗体、医学技术、生物化学、模式生物、微生物、植物、载体、毒理、营养、平台等等相关技术的各种大量试剂。
其中分子技术相关试剂类别如下:
DNA萃取试剂专题
胶回收或PCR产物纯化试剂专题
基因组DNA纯化试剂专题
法医学基因组DNA萃取试剂专题
DNA连接试剂专题
PCR反应试剂专题
RNA纯化试剂专题
RT-PCR试剂专题
RNA分析试剂专题
微型RNA(miRNA)试剂专题
核酸电泳试剂专题
报告基因检测试剂专题
甲基化分析试剂专题
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文献和实验DNA胶回收电泳上样技巧:小孔琼脂糖凝胶比大孔更利于DNA回收
相关专题 DNA连接与转化 DNA胶回收电泳时通常选择跑大孔的琼脂 糖凝胶。对于大孔的琼脂 糖凝胶,电泳之后的待回收DNA条带通常分布面积较大,弥散且不够清晰,给后续的切胶和回收带来不便。尝试用小孔加样方式对待回收DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳 ,取得了不错的效果。 选择两种不同长度的待回收DNA样品(约800 bp和1700 bp),分别用小孔和大孔琼脂糖凝胶(浓度均为1.5 %)进行电泳。每种待回收的DNA样品体积均
O 饱和酚 240? 滋 l,氯仿: 异戊醇 (49:1,v/v) 50? 滋 l,剧烈震荡 10 秒钟,冰浴 15 min;(3)4 ℃,10,000×g 离心 30 min,使其充分分层,水相应透明无任何混浊 [注:RNA 在上 层水相,DNA 和蛋白质在中间相和酚相中];(4)将上层水相转移至另一离心管中,加入 2.5 倍体积的无水乙醇,-20 ℃ 沉淀 30 min,4 ℃,10,000×g 离心 20 min;(5)弃上清,加入 100? 滋 l GuSCN 缓冲液将 RNA 沉淀溶解
静置约 1 h,直至凝胶溶液完全聚合凝固,小心拔出梳子,准备上样。 上样 向电泳槽中加入电泳缓冲液,要求两块玻璃内侧电泳液高于上样孔,外侧电泳槽内电泳液浸没凝胶底部,玻璃板内侧液面高于外侧,根据测得浓度计算的样本上样量点样(已处理好的样品,蛋白预染 Marker),保证每孔总蛋白量在 30-50 μg,确保总上样量体系小于 30 μL,注意上样时间尽量短,避免样品扩散。 电泳 上样后,盖好电泳槽的盖子,注意正负极,并选择适当的电压进行电泳。通常在不连续的系统中,上层浓缩胶的电泳电压(建议
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