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- 抗体活性检测预实验用于确定目的基因抗体的有效性——检测Western blot抗体是否有效，是否能够识别在目的细胞中目的基因的内源表达，确定总蛋白上样量，抗体稀释比例，显色曝光时间等参数。 如果抗体不工作，或者无法识别目的细胞中的内源表达蛋白条带，则后续RNAi实验中的Western Blot验证RNAi效应实验无法进行。
- 2026年04月21日
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抗体活性检测预实验（WB）
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上海吉凯基因化学技术有限公司
| 抗体活性检测预实验（WB）
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抗体活性检测预实验用于确定目的基因抗体的有效性——检测Western blot抗体是否有效，是否能够识别在目的细胞中目的基因的内源表达，确定总蛋白上样量，抗体稀释比例，显色曝光时间等参数。
如果抗体不工作，或者无法识别目的细胞中的内源表达蛋白条带，则后续RNAi实验中的Western Blot验证RNAi效应实验无法进行。 服务优势
 服务流程  服务说明  Western Blot预实验范例 收集生长状态良好的目的细胞，提取蛋白，采用Western Blot的方法检测目的基因的表达情况。Western Blot预实验所用的抗体为客户提供，预实验时，抗体工作浓度是抗体说明书建议的抗体工作浓度的两倍。 检测结果如下：  PC为抗体说明书建议的作为阳性对照用细胞蛋白样品。上图显示A细胞目的基因表达丰度更高。 Ø 相关服务： Western Blot基因表达检测 Ø 相关产品： 常用细胞株 上海吉凯基因医学科技股份有限公司 地址：上海张江高科技园区爱迪生路332号 邮编：201203 全国热线：4006210302 售前顾问：13818254889；17600138744 邮箱：service@genechem.com.cn URL：https://www.genechem.com.cn/ |
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文献和实验prince1101 非磷酸化抗体是识别总得蛋白的，比如AKT。 P-AKT和AKT其实只差一些磷酸基，分子量稍大点，以前听别人讲P-AKT和AKT之间有shift，有时候WB是可以做出来的。 用的是梯度胶？分子量在68KD左右。应该怎么样来配胶呢？梯度胶的浓度？ 谢谢！ prince1101 希望高手能赐教！ ourlab 某些 AKT抗体，如cell
WB(western blot)实验，为分子生物学经典实验之一。常用来进行蛋白分子量估算，蛋白功能研究等实验。 在该实验中，需要进行一抗、二抗及荧光底物孵育等过程。常规情况下将经过转印的PVDF膜等于玻璃皿中或者杂交袋中与抗体孵育。但是，在玻璃皿中孵育，常常使用抗体的量较大，且抗体回收导致抗体的质量下降；在杂交袋中孵育，虽然使用抗体较少，但是常导致杂交袋和转印膜（PVDF
抗体孵育——WB真正的难点：抗体的使用是一种艺术，一种抗体一个脾气。对WB结果有决定性影响的因素是抗体的效价和如果正确使用手中的抗体。无论你如何提高自己的转膜技术，高效和低效之间往往只有数倍的差异，而抗体的效价可以差数千倍以上；同样，正确使用抗体可以保证抗体效价不被过分的拮抗，谋求特异性和非特异性背景之间差异的最大化。 封闭最短可以缩减到5min： 很多人把高背景或者黑板，认定为封闭不充分，其实这也是没有吃透WB（说实话，经常看到坛子上很多人这样给人答疑，非常的无语）；实际上封闭（极端
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