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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
500G
脱脂奶粉
| Blotting实验专用 制造商:FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation 制造商:(富士胶片和光) 储存条件:室温 |
|
◆概况
脱脂奶粉,脂肪含量低,蛋白含量高。配制成0.3~5%的水溶液使用。
用途
作为抗体反应等的印迹封闭溶液使用,也可用于干燥标本的巴氏染色前处理。
注意点
当一抗为抗磷酸化抗体时,脱脂奶粉由于含有较多磷酸化蛋白,请改为使用BSA。
◆应用实例
<Western Blotting应用实例1>
|
低背景! |
1. 1 w/v% Skim milk in TBS-T 2. 5 w/v% BSA(Albumin, from Bovine Serum) in TBS-T
上样量:10 ug of cell lysate/Lane 抗体:Anti β-actin antibody |
<Western Blotting应用实例2>
|
低背景! |
1. 5w/v% Skim milk in TBS-T 2. Company A Protein-free Blocking Buffer
样品:DYKDDDDK-BAP Lane#1: 10 ng Lane#2: 5 ng Lane#3: 2.5 ng Antibody : Anti DYKDDDDK antiboby |
◆物性信息
外观
白色~淡黄色,粉末
溶解性
在水中变浑浊然后溶解。
◆产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| 190-12865 | Skim Milk Powder 脱脂奶粉 |
500 g |
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文献和实验相关专题 生物实验中的封闭剂 Q:western blot 中脱脂奶粉封闭的是哪些蛋白?原理是什么? A:脱脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原 的蛋白去封闭膜,避免标记抗体固定在膜上引起背景增高。 Q:请问封闭液和抗体稀释液用BSA 和脱脂奶粉有什么区别呢? 有人跟我说奶粉的封闭效果更好些,但是通常只能用于WesterBlot,如果要做ELISA或者phage display
Western Blot 现在仍然是检测和分离蛋白最常用的一种实验方法,但是要想得到较好的结果并不容易,只有找到合适的实验条件并进行优化,才能以更少的时间得到更多的结果,达到事半功倍的效果!下面是 R&D Systems 品牌为您推荐的免疫印迹优化步骤和实验涉及参考数据:一抗浓度对实验结果的影响抗体:Human/Mouse/Rat RSK1 Antibody (Catalog # AF992)样本:人 HeLa 细胞 (Fig.1)A:5% 脱脂奶粉封闭,一抗浓度:1.0 mg/mL,溶于
是不是做 Western 的时候,会遇到这样的情况呢?没错,就是背景很脏。造成背景脏的原因有很多,比如一抗没洗干净,或者二抗没洗干净,还有就是封闭的时候不完全。但其实,封闭液也是你们很容易忽略的一个环境哈。封闭液有几种?除了脱脂奶粉和 BSA 还有啥你们能想到的?第一种封闭液就是脱脂奶粉,这是异常便宜的封闭液品种,当然也应该是你们最常用的封闭液配方了。(甚至我们用过特仑苏)但是,你们应该注意到的是,脱脂奶粉中有大量的生物素,也就是说你做的蛋白要是用生物素标记的,一抗也是抗生物素的。那用脱脂奶粉
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