马来酸二乙基己酯

延胡索酸 fumaric acid

　　延胡索酸 fumaric acid 为乙烯的反式二羧酸 [反丁稀二酸 ]。它的顺式为马来酸（顺丁烯二酸）。它除以钾盐的形态广泛存在于植物 界（例如 Fumaria officinalis）外，还可通过微生物发酵生成（延胡索酸发酵）。在好氧代谢中，它作为三羧酸循环的一环起重要作用，琥珀酸如为琥珀酸脱氨酶所氧化，便生成延胡索酸。后者在延胡索酸的作用下，加一分子 H2O，就形成苹果酸。这些酶促反应是可逆的，在大多数细胞和组织的呼吸途径中，占有重要的位置。  

核酸杂交法检测病原微生物

DNA量为0.5~3ug，如标记大量DNA需相应增加反应物和反应体积。若延长37℃孵育时间(到20h)可增加DIG标记产物量。 　　（二）斑点杂交法 　　【材料】 　　1．硝酸纤维素膜，待检标本DNA 　　2．标准预杂交液（5× SSC；0.1％月桂酸；0.02％SDS；1／10体积的10倍浓缩阻断液(含变性并剪切的鲑精DNA)。 　　3．洗液1（2×SSC，0.1%SDS）; 洗液2 (0.1×SSC，0.1 %SDS)。 　　【方法】 　　1．杂交膜的制备 　　①

(交流）原位杂交操作技术步骤

后置-20℃保存 20×SSC 10×PBS （DEPC处理的）含50%甲酰胺的杂交液（HS）--- 1ml分装后置-20℃保存 10×阻断液（10×BS） Buffer I Buffer II Buffer III 探针（P） 抗Dig-Ap NBT/BCIP 二、操作流程: 1）  脱蜡至水： 二甲苯5min×2 → 90%乙醇5min → DEPC水洗涤5min×2 2）  杂交前处理： 1×PBS洗涤5min → 蛋白酶K（终浓度20ug/ml in PBS）37℃