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低温
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2年
- 英文名：
北诺
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1000
- 供应商：
北诺
- CAS号：
植物表达载体
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文献和实验【求助】关于克隆包含pri-miRNA的基因组片段到表达载体来表达miRNA的问题
zwmc 很多文章使用这种方法来表达miRNA, 而且我在论坛上看到很多坛友也比较推崇这个方法。但是我最近遇到了问题：我想要克隆表达的miRNA具有5p和3p两种剪切形式，理论上我把包含该pri-miRNA的基因组片段到表达载体在细胞里表达之后，这种情况下我表达出来的miRNA是兼有5p 3p两种形式？或者是只有一种呢？ 很困惑，请大家不吝赐教！ 吴佰霖 1. 查文献，看这个miRNA的5p和3p是否都有表达
将特定的外源基因构建在植物表达载体中并转入受体植物，并不是植物遗传转化的最终目的。理想的转基因植物往往需要外源基因在特定部位和特定时间内高水平表达，产生人们期望的表型性状。然而，近二十年的发展历史却表明，外源基因在受体植物内往往会出现表达效率低、表达产物不稳定甚至基因失活或沉默等不良现象，导致转基因植物无法投入实际应用。另外，转基因植物的安全性问题已在许多国家引起人们的关注，例如，转基因有可能随花粉扩散，抗生素筛选标记基因有可能使临床上的某些抗生素失去作用等等。以上问题的出现使得植物
类似物的瞬时表达方式。miRNA的过表达载体中有插入成熟miRNA、pre-miRNA及pri-miRNA序列三种形式。其中pri-miRNA（含侧翼序列）的方式由于保留了每个microRNA独自的原始天然双臂结构，效果更好，是应用最为广泛的方法。microRNA过表达系统中有CMV启动子（II型启动子）和H1启动子（III型启动子）两种方式供选择。III型启动子（H1、U6等）具有表达效率高、有效的确定终止位置等优点，成为首选。II型启动子适用于pri-miRNA序列中有连续的5个T-导致III
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