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文献和实验一. 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类:一类是直接基因转移技术,包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等,其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法,主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法,其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转化率高,广泛应用于双子叶植物的遗传转化。二.农杆菌介导的基因转化方法 (一)农杆菌的Ti质粒与T-DNA 的整合机制几乎所有双子叶植物都容易受到土壤农杆菌感染,而产生根瘤。它是一种革兰氏阴性土壤杆菌
毛状根(hairy roots)是发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)感染双子叶植物后,其Ri质粒上的T—DNA片断整合进植物细胞核基因组中诱导产生的一种特殊表现型,近10年来已发展成一种新的培养系统。 发根农杆菌 (Agrobacterium rhizogenes)是一种革兰氏阴性菌,能侵染大多数的双子叶植物、少数单子叶植物及个别的裸子植物,诱发被感染植物的受伤部位长出毛状根。发根农杆菌之所以具有这种致根性,是因为它具有能诱导
20世纪初植物细胞全能性的概念建立以来,植物组织和细胞培养的研究已取得了很大的进展,如试管苗大量繁殖技术、单倍体技术、原生质体培养、细胞杂交、体细胞变异及突变体的选择和利用等。80年代,随着基因工程的发展,其研究成果也渗透到细胞工程中来,引起了细胞培养研究的新突破。其中通过发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)中Ri质粒介导的天然植物遗传转化,建立发根培养系统来生产原植物中的次生代谢产物成为植物基因工程和细胞工程结合的一项新技术。发根农杆菌中含有Ri质粒,其T
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