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- 2025年07月09日
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Wako
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Wako
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文献和实验蛋白质印迹免疫分析（Western Blot Anglysis）
，3.3-二氨基联苯胺）配制：5mg DAB溶于10ml 柠檬酸buffer（0.01mol/L 柠檬酸2.6ml，0.02 mol/L Na2HPO4 17.39ml），加30% H2O2 10 μl（临用时现配）。 9．脱色液：甲醇250ml，冰醋酸100ml，加蒸馏水至1000ml。 10．氨基黑染色液（0.1%氨基黑-10B）：0.2g 氨基黑-10B 溶于200ml 脱色液中，充分搅拌溶解，滤纸过滤。 【操作步骤】
，直接浸于盛有氨基黑10B的染色液中，染5分钟取出，立即浸入盛有漂洗液的培养皿中，反复漂洗数次，直至背景漂净为止。用滤纸吸干薄膜。 4. 定量 本实验不要求进行定量分析，如有需要，可采用薄层扫描仪进行扫描定量，或采用洗脱后再进行比色的方法进行定量。 5. 计算 光密度总和T=A+α1+α2+β+γ 各部分蛋白质的百分数为： 临床意义 1. 正常值：白蛋白57~72%，α1球蛋白2~5%，α2球蛋白4~9%，β球蛋白6.5~12%，γ球蛋白12~20%。
Western杂交时，为确认蛋白是否转至PVDF膜上，可用下列方法对膜上蛋白进行可逆性染色。 1. 氨基黑染色 染液：0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropanol (v/v) and 10% acetic acid. 染色：将PVDF膜置于染液中染色数钟，ddH2O 脱色。 2. 考马氏亮蓝染色 染液：0.1% Coomassie Brilliant Blue R-250 (w/v) and 50% methanol (v/v
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