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- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称:
吉满生物研发Cas9慢病毒,用于构建稳定表达Cas9蛋白的细胞株。
- 提供商:
吉满生物
- 规格:
询价
Cas9慢病毒服务
Cas9蛋白的CDS区长达4kb,将Cas9基因高效导入细胞是应用Cas9/CRISPR系统进行基因敲除的难点之一,极大地限制可供选择的将基因导入细胞的方法。
结合吉满生物优势,我们研发了慢病毒Cas9表达体系。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达。该体系采用慢病毒体系先在细胞中稳定表达Cas9蛋白,构建稳定表达Cas9蛋白的细胞系,再在该细胞系的基础上导入gRNA和基因敲除实验中用到的其它原件。
服务流程:
慢病毒Cas9可选载体:

pGMLV-GM1

pGMLV-GM2

pGMLV-GM3

pGMLV-CA1

pGMLV-CA2

pGMLV-CAGM1

服务说明:
- 客户仅需要提供目的基因ID或定制的gRNA及细胞。
- 吉满生物可提供腺病毒或普通版的Donor载体构建。
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文献和实验【1】SEMA3G-NRP1 Signaling Functions as an Immune Checkpoint that Enables Tumor Immune Evasion by Impairing T Cell Cytotoxicity,中国复旦大学,IF=12.5001,Cancer Research
分为五步,即gRNA文库选择、gRNA文库扩增、gRNA文库慢病毒包装、gRNA文库筛选、PCR扩增和NGS测序 1、gRNA文库选择 首先客户选择所需gRNA文库。如果客户根据具体需要提出文库定制(小于300个基因),我们将根据客户提供的基因群信息进行单个基因的gRNA设计,保证每个基因设计3个不同的gRNA,最大程度确保基因功能的突变。我们采用的载体是单/双慢病毒载体,单慢病毒载体是一个载体上同时携带单个gRNA和cas9基因,双慢病毒载体是一个载体上只有单个gRNA,cas9蛋白则由单独
CRISPR/Cas9文库2.0升级版—助你快速、精准地做基因筛选
Cas9蛋白是一种以RNA为导向的DNA内切酶,是一种操纵基因组的强大工具[1]。更多的研究者获益于基于CRISPR的遗传筛查,对已确定的基因有更多基因功能表型的认识[2]。早在2013年,海外的两个研究团队分别在Science杂志同一期上发表了CRISPR文库的相关研究[3,4]。这是首次关于CRISPR文库的研究,显示出比shRNA文库更有效的筛选效果。但在文库设计初始,对sgRNA活性规则知之甚少,而非活性和非特异性的sgRNA会降低文库有效基因的覆盖率及靶基因的准确
157(6) (2014) 1262-1278. [5] K.H. Siu, W. Chen, Riboregulated toehold-gated gRNA for programmable CRISPR-Cas9 function, Nat Chem Biol 15(3) (2019) 217-220. [6] X.W. Wang, L.F. Hu, J. Hao, L.Q. Liao, Y.T. Chiu, M. Shi, Y. Wang, A microRNA-inducible
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