0.25ml 微量离心管,带盖,PE,10000/箱 10

Northern blotting实验方案

振荡器，分光光度计，微量移液器，电炉(或微波炉)，离心管，烧杯，量筒，三角瓶等。 3材料 总RNA样品或mRNA样品，探针模板DNA(25 ng)，尼龙膜 4试剂 NorthernMax Kit(Cat. # 1940，Ambion, Inc.)，琼脂糖，DEPC, X光底片，底片暗盒，Random Primer， dNTP Mixture，111TBq/mmol，[a-32P]dCTP，Exo-free Klenow Fragment和10 X

目的基因片段的PCR扩增与克隆

预冷的溶液I中，剧烈振荡； ②加新配制的溶液II200µl，盖紧管盖，迅速颠倒混匀，将离心管放置于冰上； ③加150µl用冰预冷的溶液III，盖紧管口，将管倒置后温和地振荡10秒，使溶液III在粘稠的细菌裂解物中分散均匀，之后将管置于冰上3-5分钟； ④用微量离心机于4℃、12,000rpm离心5分钟，将上清液移到另一离心管中； ⑤加等量酚：氯仿（V/V），振荡均匀，用微量离心机于4℃、12,000rpm离心2分钟，将上清液转移到另一离心管中； ⑥用2倍体积的乙醇沉淀双链

总RNA和基因组DNA同步纯化试剂盒

4℃预冷的Buffer R-A，迅速用力碾磨至Buffer R-A 完全融化，继续碾磨30sec。 （4）将匀浆转入1.5 ml 离心管。如匀浆残留较多，加100μl Buffer R-A，适当研磨后，收集合并到1.5ml 离心管。 （5）用带4～6 号针头的1ml 注射器反复吸注10次。 匀浆充分与否是决定RNA 和DNA 得率的关键。匀浆完全时，溶液不再粘稠，很容易从注射器针头上呈不连续滴状滴落，而非连续状。 [酵母菌] （1）取5×107对数生长期酵母菌，10000×g 离心20