175cm²贴壁细胞培养（标准盖）

生理状态下常见细胞流体剪切力实验类型及特征简要介绍

、流动剪切应力对细胞的影响剪切应力是由液体对顶端细胞膜的摩擦引起的机械力。在体内，几种贴壁细胞类型暴露于生物流体系统中的机械剪切应力，例如血液和淋巴管或肾单位。 这种机械刺激对细胞的生理行为和粘附特性有很大影响。细胞通过离子通道激活，基因表达和整个细胞层的重组的变化对剪切应力起反应。 上图显示了 HUVEC 在流动条件下（20 dyn /cm²）培养 μ-SlideI 0.4 Luer 超过 9 天。 为了观察细胞骨架，用腺病毒载体转导细胞 RAV 巨细胞病毒-LifeAct-TagRFP 实验

Western 实验步骤

样本准备 蛋白提取 所需仪器：匀浆器、RIPA 裂解液、PMSF（蛋白酶抑制剂）、磷酸酶抑制剂、剪刀、镊子，消毒酒精棉、PBS、移液器、离心机。 裂解液配制——RIPA 裂解液：PMSF=100：1。 1） 组织处理：首先用酒精棉消毒剪刀和镊子，取适量的组织于匀浆器中，用剪刀剪碎加适量的裂解液冰水中匀浆 1-4 min。匀浆结束后吸取溶液于 EP 管中保存备用。（含血液较多的组织可先用 PBS 清洗后再匀浆） 2） 细胞处理： A、 贴壁细胞处理：去掉培养基用 PBS 清洗后加入适量的裂解

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色

之一，什么单位，我不是很懂。能详细解释浓度吗。 eeflying:哦，国际标准单位用惯了？！ 0.1g AO溶于10ml水称为1%，百分之一稀释一千倍成为十万分之一 。1ml培养液中加1ul ＡＯ即为千分之一喽。 fffwu: 正常对照做好了，暂时发不上来（附件太大）。 以前贴壁的这个细胞也染过，结果：正常对照很漂亮，但是凋亡细胞样子十分怪异，等我扫描后传上。 现在做的都是消化下来染的。 eeflying:贴壁细胞不应该消化下来染, 这就是你染的细胞中竟然没有一个有着火焰色胞质的原因。细胞RNA