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文献和实验、流动剪切应力对细胞的影响剪切应力是由液体对顶端细胞膜的摩擦引起的机械力。在体内,几种贴壁细胞类型暴露于生物流体系统中的机械剪切应力,例如血液和淋巴管或肾单位。 这种机械刺激对细胞的生理行为和粘附特性有很大影响。细胞通过离子通道激活,基因表达和整个细胞层的重组的变化对剪切应力起反应。 上图显示了 HUVEC 在流动条件下(20 dyn /cm²)培养 μ-SlideI 0.4 Luer 超过 9 天。 为了观察细胞骨架,用腺病毒载体转导细胞 RAV 巨细胞病毒-LifeAct-TagRFP 实验
第三章 细胞培养和转染 1. 细胞培养(HEK293T) 1) 显微镜下观察细胞,细胞生长状态良好,去上清; 2) 加入预热的PBS 3ml, 温柔地清洗细胞,弃去PBS; 3) 用胰蛋白酶消化细胞,通常75cm2 培养瓶的贴壁细胞用3ml 胰蛋白酶于37oC 处理5min; 4) 待细胞脱落后,加入5ml DMEM 培养液(含10%FBS)以终止消化反应,并将 细胞悬液转移入15ml 或50ml 离心管中; 5) 1000rpm 离心5min,去除上清
可以用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究。该方法往往被用于贴壁细胞的转染,也是最好的方法。 1. 试剂的配制 (1)2×HBS 1.63 g NaCl ;1.19g Hepes;0.023 g Na2 PO4 ·2H2 O;加水至100 ml pH 7.1 过滤,4℃保存 (2)2mmol/L CaCl2 过滤除菌 (3)TE:0.1mmol/L EDTA,1mmol/L Tris-HCL PH 8.0 (4)G418(新霉素G418)液:1g G418溶于
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