Easyflask易用培养瓶，25cm2，密封盖

细胞培养注意事项（入门级）

达到70－80%就可以传代。早点传代也可以。如果是贴壁生长的细胞：1） 培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液；2） 无菌PBS或无菌生理盐水洗涤3次（按培养体积加入）；3） 加入适量胰酶消化适当时间（一般胰酶为0.25%；9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，一次加入1mL胰酶。消化时间视细胞类型等多种情况综合考虑，一般如果是细胞株，非原代培养，消化1－2分钟足矣）；4） 用枪头吹打数十次（视细胞类型而定。一般细胞株30－50次吧，耗时一般2分钟左右）；5） 加入适量体积完全培养基终止

利用定量数据改善细胞培养过程

观察培养物以及手动记录观察位置的时间安排。另外，由于系统能够随着时间推移监控相同位置的培养状态变化，因此可以让您确认细胞的行为和生长过程（图 3）。     当前 CM20 观察时间 取决于研究人员的日程安排 3-24 小时间隔时间 观察位置 取决于研究人员的技能和经验 固定点： 25 点（T75 细胞培养瓶） 图 2. 比较细胞测量   图 3.观察同一位置随时间发生的变化   轻松获取定量数据 通过使用图像处理和机器学习技术，CM20 监控系统还可对细胞进行计数

家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法

冲洗干净。 加入少量含血清的培养液。(组织块不宜过小，否则不容易爬出足够数量的细胞)3、接种：用吸管吸取小组织块入培养瓶底部，摆放均匀，一个25cm2的培养瓶可放置10-15个小组织块，翻转培养瓶，加入少量培养液。4~6小时后，待组织块充分贴壁后，再翻转回来（动作一定要轻巧，以免刚刚贴壁的组织块脱离瓶底）4、置于5%CO2孵箱中培养，每隔3天换液。待细胞95%融合时，0.25胰蛋白酶传代分瓶。Method 2 消化法前面步骤同组织块法1，2。（3）组织块再进一步剪切，此时培养液中最好不加血清。完毕