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- 2025年07月13日
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上海古朵生物科技有限公司
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文献和实验臂区域如果 GC 含量过高过低，或者有重复序列，都可能在核酸外切酶切割后形成发卡结构，影响重组效率，可以使用质粒设计软件来检查同源重组臂的设计。 ⑤插入序列本身的问题：有些序列本身存在连接载体困难、连接产物不稳定、连接产物在大肠杆菌中复制困难等问题。对于这类序列可以考虑将序列打断后分步构建，或者更换载体或感受态的方式尝试解决。 2. 质粒提取量不足 质粒提取量少常见的原因可能是： ①摇菌时间过长：大肠杆菌生长已经超过对数期，细菌老化，导致细胞和 DNA 降解。 ②摇菌时间不足：细菌生长不充分
可以采取现在比较常用的TRIzol一步法。不要使用带柱子的RNA提取试剂盒，因为除了专门用于提取miRNA的试剂以外，绝大部分柱子无法捕获20nt左右的miRNA。 2、电泳 （1）配制15%的尿素变性PAGE胶，可以先用预冷的0.5XTBE缓冲液作为电泳缓冲液，60V预跑30min。 （2）将样品与RNA loading buffer按比例混合，70℃预热5min，立即放置冰上。 （3）上样前，用缓冲液冲洗点样孔，防止点样孔中的杂质影响电泳。 （4）点样时，使样品均匀铺在点样孔底部
stem cell公司MACS产品主要技术有以下几类：一、EasySep® 磁性正选或负选细胞，不需柱子；二、StemSep® 磁性正负分选，需要柱子；三、RosetteSep® 免疫梯度离心分选，不需磁极，不需柱子；四、SpinSep®负选产品 。以下一一介绍。一、EasySep®磁性正选或负选细胞，不需柱子用于正、负选人或其它种类动物的细胞EasySep® 是一种新型而高效的免疫磁珠细胞分选技术，具有单克隆抗体的特异性和无分离柱磁性系统的简便性。靶细胞表面特异性的抗原抗体反应为富集细胞提供
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