Qubit 3.0荧光计（Qubit Fluorometer

经验优化与高级技巧篇

1. Qubit 定量与紫外分光光度计定量的区别 在常规实验室对核酸定量的检测中，常会用到紫外分光光度计（或 Nanodrop）和 Qubit 两种检测方法，二者在原理、准确性、操作难易等方面存在显著差异。 ①首先两者原理不同，紫外分光光度计基于核酸的紫外吸收特性来实现对核酸的定量：核酸（DNA/RNA）在 260nm 波长处有特异性吸收峰，且吸光度与核酸浓度成正比；Qubit 基于荧光染料与核酸特异性结合的原理来实现对核酸的定量，两者结合后荧光强度与核酸浓度成正比，通过标准曲线校准实现定量

干货| CUT and Tag 技术全方位解答

片段。 8. CUT&Tag 实验完成后，怎么进行质控？ 可以用 Qubit 进行浓度检测，Agilent2100 等可以检测片段分布的仪器进行文库峰型检测（如果研究组蛋白修饰，可以得到梯状条带分布）。如果没有检测片段分布的仪器，可以考虑使用 2% 的琼脂糖凝胶电泳代替，但是灵敏度会低，组蛋白修饰实验也有可能看不到典型的梯状条带。如果做转录因子，上机之前可以根据 ChP-seq 数据库里面的 peak 设计引物检测与 GAPDH 等内参位点对照，通过 qPCR 来确定目的靶点的富集程度

结果分析篇

预期范围内，对后续的实验影响相对较小，可以灵活分析此数值。 Nanodrop 是通过测量物质对不同波长光的吸收程度来进行分析的，如果样本中有其他相近吸收峰的杂质，则有可能会导致 Nanodrop 检测值虚高。 如果在实验中遇到 Nanodrop 检测质粒浓度很好，但是下游实验总是失败，有可能是 Nanodrop 检测质粒浓度虚高的问题。此时可以考虑通过琼脂糖凝胶电泳检测目的条带灰度比对来粗略估算质粒的浓度，判断是否是 Nanodrop 检测值虚高太多，也可以用 Qubit 或者毛细管电泳再次检测