Human CD25/IL-2Rα Valukine ELI

Human CD25/IL-2Rα Valukine ELISA Kit

人 CD25/IL-2 Rα ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号：VAL122
适用于定量检测天然和重组人 CD25/IL-2 Rα的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

I. 背景
IL-2的生物学活性是通过其与一个多分子细胞受体复合物的结合而介导的。IL-2受体
复合物的模型(1-5)可以被描述为αβγ形成的三聚体高亲和力受体，三个链都与配体接触。
可以传递IL-2信号。
IL-2 Rα (也称为Tac抗原和CD25)是由351个氨基酸组成的55 kDa跨膜糖蛋白，其中
只有13个氨基酸位于细胞膜的胞质侧。IL-2 Rα缺乏细胞因子受体超家族的结构特征。IL-2
Rα自身与IL-2的亲和力较低(6-8)。
血清中含有IL-2 Rα可溶形式, 同时伴随着细胞表达IL-2 Rα的增加(9-10)。由于IL-2
Rα的低结合亲和力，使其被认为是IL-2比较差的抑制剂，所以可溶性IL-2 Rα的功能至今
尚不清楚。据报道，在任何情况下，体液中可溶性IL-2 Rα水平增加都与T细胞和B细胞的
活化、免疫系统激活水平增强具有相关性。许多研究结果表明，血清中IL-2 Rα水平与同
种异体移植物受体排斥反应的发生有关(9,11-12)，并和自身免疫性疾病如类风湿性关节炎
和系统性红斑狼疮(SLE)的活动具有相关性(13)，以及与一些白血病和淋巴瘤过程相关
(14-18)。

II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人CD25/IL-2 Rα捕获抗体包被于微孔板上，样品
和标准品中的人CD25/IL-2 Rα会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加
入生物素化的抗人CD25/IL-2 Rα检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链
霉亲和素标记的辣根过氧化物酶(Streptavidin-HRP) 孵育。洗涤去除未结合的试剂后，加
入TMB底物溶液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标
仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释剂（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。

III. 优势
A. 精确度
板内精确度（同一板内不同孔间的精确度）
已知浓度的三个样本，在同一板内分别检测 20 次，以确定板内精确度。
板间精确度（不同板之间的精确度）
已知浓度的三个样本，在不同板中分别检测 20 次，以确定板间精确度。
Intra-assay Precision Inter-assay Precision
Sample 1 2 3 1 2 3
Mean (pg/mL) 90.4 253.0 867.7 89.1 251.9 826.0
Standard Deviation 4.4 9.7 25.4 4.5 9.5 50.4
CV% 4.9 3.8 2.9 5.0 3.8 6.1
B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人 CD25/IL-2 Rα，测定其回收率。回收
率范围在 96.3-108.6%，平均回收率在 104.1%。
C. 灵敏度
人 CD25/IL-2 Rα的最低可测剂量（MDD）一般小于 9.15 pg/mL。

D. 校正
此 ELISA 试剂盒经由 R&D Systems®生产的 NS0 表达的高纯度重组人 CD25/IL-2 Rα蛋
白所校正。
E. 线性
不同的样本中含有或掺入高浓度的人 CD25/IL-2 Rα，然后用标准品稀释剂（1×）将样本
稀释到检测范围内，测定其线性。