Human IFN-beta Valukine ELISA

Human IFN-beta Valukine ELISA Kit

适用于定量检测天然和重组人 IFN-β的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效

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I. 背景
β干扰素(IFN-β)，又称成纤维细胞IFN，是一种分泌型，约22 kDa的I型干扰素家族
成员(1)。成熟人IFN-β与小鼠和大鼠蛋白的氨基酸序列同源性分别为47%和46%。IFN-β
主要由成纤维细胞产生，但它也可以由树突状细胞、巨噬细胞和内皮细胞产生，以应对
病原体暴露 (2)。它由TRAF3、IRF3、IRF7和NFκB转录调控(3, 4)。也有研究表明，
RIPK1和RIPK3激酶在LPS诱导的小鼠IFN-β上调中发挥作用(5)。分泌后，IFN-β通过异
二聚体IFN-α/β受体发出信号并激活JAK/STAT信号通路(6-9)。IFN-β在炎症小体的调节
中起着复杂的作用。它被证明以STAT1依赖的方式直接抑制NLRP1和NLRP3炎症小体，
并增加小鼠对白色念珠菌感染的易感性(10)。相反，单核球增多性李斯特菌已经证明以
IFN-β依赖的方式激活NLRP3炎症小体(11)。病毒感染人类微肠道器官可诱导IFN-β，从
而导致Viperin和IFIT1 IFN刺激基因的上调(12)。
IFN-β缺陷型小鼠对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的易感性增加，EAE是人类多
发性硬化症(MS)的疾病模型(13)。此外，IFN-β在MS和EAE中都能抑制Th17细胞的反应，
并且通常被用来治疗MS (14-18)。低水平的IFN-β与脓毒症患者单核细胞的低反应状态
有关，提示IFN-β可能在恢复单核细胞功能和逆转免疫抑制中发挥作用(19)。I型干扰素
(IFN-α和IFN-β)似乎在肿瘤中性粒细胞极化中起作用。炎症和功能性I型IFN信号已被证
明改变中性粒细胞向抗肿瘤表型的极化(20)。

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II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人IFN-β抗体包被于微孔板上，样品和标准品
中的人IFN-β会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着加入生物素化的抗
人IFN-β检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加入链霉亲和素标记的辣根过
氧化物酶（Streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试剂后，加入TMB底物溶液（显
色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。

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III. 优势
A. 精确度
板内精确度（同一板内不同孔间的精确度）
已知浓度的三个样本，在同一板内分别检测20次，以确定板内精确度。
板间精确度（不同板之间的精确度）
已知浓度的三个样本，在不同板中分别检测20次，以确定板间精确度。
板内精确度 板间精确度
样本 1 2 3 1 2 3
平均值 (pg/mL) 16.3 53.2 192.4 16.6 53.0 188.9
标准差 0.6 1.0 4.6 1.0 1.1 7.6
CV% 3.7 1.9 2.4 6.0 2.1 4.0
B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人IFN-β，测定其回收率。回收率范围
在84.0-122.6%，平均回收率在98.1%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人IFN-β，测定其回收率。回收率范围在
85.3-120.1%，平均回收率在97.1%。
C. 灵敏度
人IFN-β的最低可测剂量（MDD）一般小于0.175pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。