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- 详细信息
- 技术资料
- 样本:
Cell culture supernates, serum, and plasma.
- 标记物:
FGF-21
- 适应物种:
Human
- 应用:
VAL207
- 检测方法:
定量检测天然和重组人成纤维细胞生长因子 21(FGF-21)的浓度
- 检测范围:
31.3-2000
- 规格:
96T
Human FGF-21 Valukine ELISA Kit
目录号:VAL207
适用于定量检测天然和重组人成纤维细胞生长因子 21(FGF-21)的浓度
科研专用,不可用于临床诊断
有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效
21
I. 背景
成纤维细胞生长因子 21(Fibroblast growth factor 21 , FGF-21)是 FGF 基因家族的一
个成员,该基因家族包含 22 个哺乳动物成员。根据其结构,它又被归类为 FGF-19 亚
家族成员,该亚家族还包括 FGF-19 和 FGF-23 (1-4)。FGF 家族成员包含一个 120 氨
基酸(amino acid ,aa)的核心 FGF 结构域,该结构域呈β-三叶形结构。与其他 FGF
不同的是,FGF-19 亚家族成员缺少β-三叶草结构的一条链,与肝素等细胞外基质分子
的结合力较差 (3)。它们比其他成纤维细胞生长因子更易扩散,被认为是内分泌性的,
而不是旁分泌性的(1-4)。所有三个亚家族成员都会影响新陈代谢的某些方面;所有
三个亚家族成员都会受到包括类视黄醇 X 受体(retinoid X receptor, RXR)在内的核受
体异二聚体的诱导,并且所有三个亚家族成员都会通过 klotho 家族的共受体间接结合
FGF 受体(FGF R)(FGF receptors,FGF R)(5-9)。FGF-21 通过其 C 端序列与
β-Klotho 结合。这种结合以及 N 端的氨基酸是通过 FGF R 信号转导(7,8)。FGF-21
对 FGF R1 受体亚型 1c 有特异性,关于使用 2c 或 3c 亚型的报告则有所不同(10-12)。
所需 klotho 和 FGF R 家族成员的存在决定了 FGF-19 亚家族成员的组织特异性,从而
使 FGF-21 的活性集中在脂肪组织内(3,9-11)。成熟的人 FGF-21 与小鼠和大鼠
FGF-21 有 81%的 aa 序列相同性。
肝细胞在游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)刺激 PPARα/RXR 二聚体复合物时会产生
FGF-21(4,13-15)。这种情况发生在饥饿、糖尿病酮症或摄入高脂肪/低碳水化合物
或生酮饮食后(5,14-16)。FGF-21 分泌后,会诱导白色脂肪组织从甘油三酯储存库
中释放出 FFAs。一旦 FFAs 到达肝细胞,就会被氧化并还原成乙酰辅酶 A(16)。乙
酰辅酶 A 被重新组合成 4 -碳酮体(乙酰乙酸酯和 β-羟基丁酸),释放出来并输送到外
周组织用于产生能量(5,15,16)。
人或小鼠成纤维细胞分化为脂肪细胞时,也会诱导 FGF-21 的产生(17,18)。在脂肪
组织中,FGF-21 通过与 PPARγ协同传递信号,增加葡萄糖转运体 GLUT1 的生成,从
而诱导葡萄糖摄取(10,12,19)。FGF-21 的产生遵循小鼠的昼夜节律(20)。它可
以通过血脑屏障扩散,这可能有助于诱导倦怠状态或活动减少,以应对 FGF-21 的增
加(16,21)。在冬季禁食和日照时间短的情况下,这些特征似乎会诱发类似冬眠的状
态(22)。在饮食诱导的肥胖小鼠和糖尿病小鼠模型,如 db/db 和 ob/ob 中,服用或转
基因过表达 FGF-21 可使循环血糖和甘油三酯值恢复到接近正常值,并提高胰岛素敏感
性(5,6,14,23,24。)在其中一些状态以及人类肥胖症和 II 型糖尿病中,治疗前
FGF-21 已经升高,这表明 FGF-21 可能具有抗药性(17,25,26)。虽然服用 FGF-21
能纠正小鼠的肥胖症,但目前还不清楚人类是否也能从中获益(2,3,17,26-28)。
I. 背景
成纤维细胞生长因子 21(Fibroblast growth factor 21 , FGF-21)是 FGF 基因家族的一
个成员,该基因家族包含 22 个哺乳动物成员。根据其结构,它又被归类为 FGF-19 亚
家族成员,该亚家族还包括 FGF-19 和 FGF-23 (1-4)。FGF 家族成员包含一个 120 氨
基酸(amino acid ,aa)的核心 FGF 结构域,该结构域呈β-三叶形结构。与其他 FGF
不同的是,FGF-19 亚家族成员缺少β-三叶草结构的一条链,与肝素等细胞外基质分子
的结合力较差 (3)。它们比其他成纤维细胞生长因子更易扩散,被认为是内分泌性的,
而不是旁分泌性的(1-4)。所有三个亚家族成员都会影响新陈代谢的某些方面;所有
三个亚家族成员都会受到包括类视黄醇 X 受体(retinoid X receptor, RXR)在内的核受
体异二聚体的诱导,并且所有三个亚家族成员都会通过 klotho 家族的共受体间接结合
FGF 受体(FGF R)(FGF receptors,FGF R)(5-9)。FGF-21 通过其 C 端序列与
β-Klotho 结合。这种结合以及 N 端的氨基酸是通过 FGF R 信号转导(7,8)。FGF-21
对 FGF R1 受体亚型 1c 有特异性,关于使用 2c 或 3c 亚型的报告则有所不同(10-12)。
所需 klotho 和 FGF R 家族成员的存在决定了 FGF-19 亚家族成员的组织特异性,从而
使 FGF-21 的活性集中在脂肪组织内(3,9-11)。成熟的人 FGF-21 与小鼠和大鼠
FGF-21 有 81%的 aa 序列相同性。
肝细胞在游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)刺激 PPARα/RXR 二聚体复合物时会产生
FGF-21(4,13-15)。这种情况发生在饥饿、糖尿病酮症或摄入高脂肪/低碳水化合物
或生酮饮食后(5,14-16)。FGF-21 分泌后,会诱导白色脂肪组织从甘油三酯储存库
中释放出 FFAs。一旦 FFAs 到达肝细胞,就会被氧化并还原成乙酰辅酶 A(16)。乙
酰辅酶 A 被重新组合成 4 -碳酮体(乙酰乙酸酯和 β-羟基丁酸),释放出来并输送到外
周组织用于产生能量(5,15,16)。
人或小鼠成纤维细胞分化为脂肪细胞时,也会诱导 FGF-21 的产生(17,18)。在脂肪
组织中,FGF-21 通过与 PPARγ协同传递信号,增加葡萄糖转运体 GLUT1 的生成,从
而诱导葡萄糖摄取(10,12,19)。FGF-21 的产生遵循小鼠的昼夜节律(20)。它可
以通过血脑屏障扩散,这可能有助于诱导倦怠状态或活动减少,以应对 FGF-21 的增
加(16,21)。在冬季禁食和日照时间短的情况下,这些特征似乎会诱发类似冬眠的状
态(22)。在饮食诱导的肥胖小鼠和糖尿病小鼠模型,如 db/db 和 ob/ob 中,服用或转
基因过表达 FGF-21 可使循环血糖和甘油三酯值恢复到接近正常值,并提高胰岛素敏感
性(5,6,14,23,24。)在其中一些状态以及人类肥胖症和 II 型糖尿病中,治疗前
FGF-21 已经升高,这表明 FGF-21 可能具有抗药性(17,25,26)。虽然服用 FGF-21
能纠正小鼠的肥胖症,但目前还不清楚人类是否也能从中获益(2,3,17,26-28)。
概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人FGF-21抗体包被于微孔板上,样品和标准
品中的人FGF-21会与固定在板上的抗体结合,游离的成分被洗去;加入辣根过氧化酶
标记的抗人FGF-21检测抗体进行孵育。洗涤去除未结合的试剂后,加入TMB底物溶液
(显色剂)。溶液颜色与结合目标蛋白成正比;加入终止液;用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用,不可用于体外诊断;
该试剂盒适用于细胞培养上清样本,人血清和人血浆;
请在试剂盒有效期内使用;
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用;
样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用标准品稀释液(1×)稀释并重复测定。
检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人FGF-21抗体包被于微孔板上,样品和标准
品中的人FGF-21会与固定在板上的抗体结合,游离的成分被洗去;加入辣根过氧化酶
标记的抗人FGF-21检测抗体进行孵育。洗涤去除未结合的试剂后,加入TMB底物溶液
(显色剂)。溶液颜色与结合目标蛋白成正比;加入终止液;用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用,不可用于体外诊断;
该试剂盒适用于细胞培养上清样本,人血清和人血浆;
请在试剂盒有效期内使用;
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用;
样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用标准品稀释液(1×)稀释并重复测定。
检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。
特异性
检测方法识别天然和重组人FGF-21。
以下列出的因子在标准品稀释液(1×)中以50 ng/mL 的浓度制备,并进行交叉反应性
测定。以下列出的因子在中值范围重组人FGF-21对照品中以50 ng/mL的浓度制备,并
进行干扰测定。未观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant human: Recombinant
mouse:
β-ECGF Flt-3/Flk-2 Ligand MSPβ FGF-8b
EGF Flt-4 MSP R FGF-8c
EGF (pro) G-CSF NGF R FGF-23
EGF R G-CSF R β-NGF FGF basic
EG-VEGF GM-CSF PD-ECGF FGF R2β
FGF-3 HB-EGF PDGF-AA FGF R3
FGF-4 HGF PDGF-AB Klotho
FGF-5 HGF Activator PDGF-BB Recombinant rat:
FGF-6 HGF R PDGF-CC FGF basic
FGF-9 HRG-α PDGF-DD FGF-BP
FGF-10 IGFBP-1 PDGF Rα Recombinan
检测方法识别天然和重组人FGF-21。
以下列出的因子在标准品稀释液(1×)中以50 ng/mL 的浓度制备,并进行交叉反应性
测定。以下列出的因子在中值范围重组人FGF-21对照品中以50 ng/mL的浓度制备,并
进行干扰测定。未观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant human: Recombinant
mouse:
β-ECGF Flt-3/Flk-2 Ligand MSPβ FGF-8b
EGF Flt-4 MSP R FGF-8c
EGF (pro) G-CSF NGF R FGF-23
EGF R G-CSF R β-NGF FGF basic
EG-VEGF GM-CSF PD-ECGF FGF R2β
FGF-3 HB-EGF PDGF-AA FGF R3
FGF-4 HGF PDGF-AB Klotho
FGF-5 HGF Activator PDGF-BB Recombinant rat:
FGF-6 HGF R PDGF-CC FGF basic
FGF-9 HRG-α PDGF-DD FGF-BP
FGF-10 IGFBP-1 PDGF Rα Recombinan
本实验中,重组小鼠 FGF-21在该检测中交叉反应率约为21%。
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