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Human FGF-21 EL
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碧云天的Human FGF-21 ELISA Kit (Human Fibroblast Growth Factor 21 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人成纤维细胞生长因子酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的FGF-21的ELISA试剂盒。本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为18.65pg/ml,与人的FGF-19、FGF-23、Klotho等均没有交叉反应,与小鼠FGF-21可以交叉识别。板内、板间变异系数均小于10%。成纤维细胞生长因子21 (Fibroblast Growth Factor 21, FGF21)属于FGF家族,根据结构特性其属于FGF-19亚族,该亚族中还包括FGF-19和FGF-23成员。FGF家族成员大都具有一个氨基酸长度为120的核心FGF区域,该区域具有β-trefoil结构。FGF-19亚族成员与其他FGFs不同,其并不含有β-trefoil结构,并且也不能与肝素等细胞外基质分子牢固结合。因此,FGF-19亚族成员与其它FGFs相比更容易扩散。FGF-19亚族成员利用辅助受体klotho家族直接与FGF受体结合,参与调控代谢相关过程。FGF-21利用C端序列与β-Klotho结合,从而传递信号。成熟的人FGF-21与小鼠和大鼠FGF-21具有81%的氨基酸同源性。当PPARα/RXR复合物受到游离脂肪酸刺激后,会刺激肝细胞产生FGF-21。FGF-21分泌后,会诱导白色脂肪组织分泌游离脂肪酸,随后游离脂肪酸在肝脏发生氧化,最终产生乙酰辅酶A,随后乙酰辅酶A与一些4碳酮结合,参与能量生成。另外在脂肪组织中,FGF-21与PPARγ协同作用,产生更多的葡萄糖转运体,从而增加葡萄糖摄取。FGF-21能够穿过血脑屏障,并造成精神迟缓,缺乏活力,在禁食或冬天时这会造成类似于冬眠的现象出现。在db/db和ob/ob小鼠中,FGF-21能够调整葡萄糖和甘油酸三酯的值恢复到接近正常的水平,并增加胰岛素的敏感性。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人FGF-21的浓度,其原理见图1。人FGF-21特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人FGF-21会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人FGF-21抗体后,生物素化抗人FGF-21抗体与人FGF-21结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人FGF-21浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中人FGF-21浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。包装清单:
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