Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 *绿色荧光*

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

产品介绍

Cell Meter™细胞凋亡检测试剂盒是用于监测细胞功能的专业工具。本产品通过检测caspase 8活性来监测细胞凋亡，该蛋白酶由CASP8基因编码，能特异性识别IETD肽段序列，在神经退行性疾病中起重要作用。

试剂盒采用(Ac-IETD)2-R110荧光底物，当caspase 8酶切R110肽段后会产生强荧光信号（激发480-500nm/发射520-530nm），兼容FITC滤光片。提供完整检测试剂和优化方案，适用于高通量筛选，可定量凋亡细胞中caspase 8活性或筛选其抑制剂。

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加（截止= 515 nm）

工作溶液配制

将50μLCaspase8底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。

注意：Caspasae 8工作液不稳定，即配即用。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间（用喜树碱或星形孢菌素处理的Jurkat细胞，4-6小时）以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 8工作溶液。

4.将板在室温下孵育30分钟至1小时，避光。

注意：如果需要，在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂，以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.以800rpm离心细胞板（特别是对于悬浮细胞）2分钟（制动关闭）。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）下监测荧光增加。

注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！