Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 *绿色荧光*

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

适用范围

用于监测细胞凋亡

产品介绍

Cell Meter™细胞检测试剂盒用于监测细胞功能的专业工具。Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒通过检测caspase 9活性来监测细胞凋亡过程。

caspase 9属于CED-3蛋白亚家族，能够激活下游caspase-3、-6和-7等蛋白酶，引发级联反应。该蛋白酶在中枢神经系统发育过程中起关键作用，对LEHD肽段序列具有高度特异性。试剂盒采用(Ac-LEHD)2-R110作为荧光底物，当caspase 9酶切R110肽段后会产生强荧光信号（激发波长480-500nm/发射波长520-530nm）。本产品提供完整检测试剂，方法稳定可靠，适用于高通量筛选，可定量凋亡细胞中caspase 9活性或筛选其抑制剂，已被众多实验室成功应用于高通量筛选研究。

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞
2.加入等体积的Caspase 9工作溶液
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.在Ex / Em = 490 / 525nm处监测荧光

工作溶液配制

将50μLCaspase9底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。 对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的半胱天冬酶9工作溶液。

4.将工作溶液板在室温下孵育至少1小时，避光。

注意：如果需要，在室温下加入测定加样溶液10分钟前，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-LEHD-CHO caspase 9抑制剂，以确认对caspase 9样活性的抑制。

5.将细胞板（特别是悬浮细胞）以800rpm离心2分钟（关闭制动器）。

6.监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度

注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！