博奥龙Biodragon货号BF03097现货BSA(牛血清

博奥龙Biodragon货号BF03097现货BSA(牛血清白蛋白)检测试剂盒(规格包装96次/盒)(价格¥2800.00元/盒)13611631389上海睿安生物

• 1、 试剂盒简介
  此定量检测牛血清白蛋白（BSA）酶联免疫试剂盒，采用抗BSA的单克隆配对抗体，分别作为包被抗体和检测抗体，组成双抗体夹心ELISA检测试剂盒，并与美国标准局的BSA标准品为参照标准，本试剂盒最低可检测到1ng/mL的BSA。
  2、 试剂盒组份：
  2.1抗BSA单克隆抗体包被的96孔板条： 1块
  2.2 BSA标准品：32ng/mL、16ng/mL、8ng/mL、4ng/mL、
  2ng/mL、1ng/mL、0ng/mL 各1瓶（0.4mL/瓶）
  2.3 BSA内部参比（20ng/mL）： 1瓶（0.4mL/瓶）
  2.4 TMB底物显色液： 1套（A和B各6.5mL）
  2.5显色底物终止液（2N，H₂ SO₄）： 1瓶（13mL）
  2.6样品稀释液 1瓶（13mL）
  2.7洗涤液（10倍浓缩）： 1瓶（50mL）
  2.8使用说明书： 1份
  2.9酶标记抗BSA抗体： 1瓶（0.13mL）
  2.10酶标记抗体稀释液： 1瓶（13mL）
  3、保存：
  本试剂盒应于2-8℃保存，有效期6个月。
  4、所需仪器：
  酶标仪（波长450nm），10μL、100μL、1mL移液器，300μl多道移液器，移液器吸头、37℃恒温水浴箱。
  5、操作步骤：
  5.1将浓缩洗涤液用蒸馏水做10倍稀释。
  5.2取出包被有抗BSA的96孔酶标板在室温放置回温。标准品各浓度做平行两孔，50μL/孔加入酶标板中。加待检样品、内部参比，各两孔，50μL/孔。然后将酶标记抗体用酶标抗体稀释液做1:100稀释，加入各反应孔，100μL/孔（酶标记抗体用多少稀释多少，现用现配）。加样过程须在15分钟内完成。
  5.3置室温20~24℃避光反应1小时，用洗涤液洗涤四遍，拍干。
  5.4用移液器加TMB底物显色液100μL/孔，请勿震荡，室温20~24℃避光反应10分钟。
  5.5用移液器加终止液100μL/孔，稍微震荡5s混匀。
  5.6在酶标仪450nm波长处读数。
  6、注意事项：
  6.1如样品中BSA含量高于32ng/mL，可将样品做适当稀释。
  6.2样品如为冻干制剂，应用样品稀释液充分溶解混匀。
  6.3反应时应将整板放入洁净的密闭空间中，为防止反应孔中落入异物。
  6.4洗涤拍干后，应消除各孔内残余的气泡。
  6.5开封后，将未使用的板条放回加入干燥剂的密封塑料袋中，置4℃密闭保存。
  6.6在操作过程中，所使用的移液器吸头、洗涤机（瓶）、器皿等均应严格避免被有BSA的环境和物品污染。
  
  7、结果判定：
  7.1实验有效参数：
  实验结果须满足以下有效参数为成立：
  0ng/mlOD值≤0.1； 32ng/mlOD值≥0.80； 阳性参考18~22ng/ml； R²≥0.98；
  7.2计算：
  在EXCEL里面以标准浓度为横坐标，消零OD值为纵坐标作散点图，添加趋势线，再显示曲线方程和R²值，将检测样品OD值消零处理后带入直线方程计算对应的浓度。
  

  标准浓度	OD1	OD2	OD3	平均值	消零OD
  0	0.069	0.062	0.064	0.065	0
  1	0.111	0.109	0.113	0.111	0.046
  2	0.13	0.127	0.131	0.129	0.064
  4	0.191	0.192	0.193	0.192	0.127
  8	0.332	0.319	0.327	0.326	0.261
  16	0.583	0.588	0.596	0.589	0.524
  32	1.039	1.025	1.054	1.039	0.974

  
  
  7.3判定：
  在标准曲线中，设OD0~16ng/mL为区间A；OD16~32ng/mL为区间B；大于OD32 ng/mL为区间C。
  7.3.1如测得的OD值小于标准曲线中2ng/mL对应OD值，则BSA含量测定结果计为小于2ng/mL。
  7.3.2如不同稀释浓度的样本测得的OD值均位于区间A，则最终结果计算取其最低稀释度的测定值。
  7.3.3如不同稀释度的测定值均位于区间B或同时位于区间A和B或同时位于区间B和C，则取其最接近OD16ng/mL的测定值。
  7.3.4如不同稀释度测定值均位于区间C，则需将样本做进一步稀释测定，使其测定值居2~32ng/mL所对应的OD值区间，计算方法按上述7.3.2-4。
  7.3.5如高稀释度测得OD高于低稀释度或未稀释的样本OD，则可能是操作失误或样本中BSA含量过高（HOOK效应），需重试或调整稀释度。
  7.3.6最终结果要考虑稀释因素（实际BSA含量＝计算值X稀释倍数）。
  8、本试剂盒技术指标
  
  8.1检测限和定量限
  检测限：零浓度标准品加上两倍的标准差（20个零孔计算值），本试剂盒检测限计算为0.2ng/mL(ppb)。定量限为标准曲线检测下限，1 ng/mL。
  
  8.2准确度和精密度
  计算批内批间变异系数，在高中低三个浓度（20、10、5）下五个重复检测计算批内变异系数，不同时间重复三次计算批间变异系数，CV%均小于10%。

  批间				批内
  浓度(ng/ml)	SD	回收率%	CV%	浓度(ng/ml)	SD	回收率%	CV%
  20	0.06	107.3	5.6	20	0.047	102.6	4.6
  10	0.049	105.4	4.7	10	0.022	101.2	2.2
  5	0.059	99.66	5.9	5	0.028	97.6	2.9

  
  8.3交叉反应
  本试剂盒对人血白蛋白，小鼠血清，兔血清，鱼明胶没有交叉反应，而对山羊血清有10%的交叉反应（以相同OD值时BSA和山羊血清的浓度的比值的百分数为准）。

  和BSA没有交叉反应的物质
  反应物质	反应浓度
  人血白蛋白	10mg/ml
  小鼠血清	10%
  兔血清	10%
  鱼明胶	1%

  
  8.4钩状效应
  当样品浓度远高于标准曲线最高浓度的时候，会产生HOOK效应，即反应OD值小于32ng/mL的BSA时候的浓度，本试剂盒为500μg/mL以上。