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- 2025年12月26日
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- 英文名：
KOD SYBR qPCR Mix
- 库存：
5
- 供应商：
研卉生物
- 规格：
1.67ml x 3支
KOD SYBR® qPCR Mix是使用KOD DNA polymerase（KOD）的SYBR® GreenⅠ检出系进行荧光定量PCR的Master mix。由于KOD SYBR qPCR Mix是去除了3’→5’核酸外切酶活性（校正活性）的KOD exo（−）DNA polymerase和最适化buffer的组合、KOD的『高效合成能力』以及『不易受到粗样品的阻害』的特性，可稳定地用于各种用途的荧光定量PCR。
特征1. 可扩增长链目的片段（〜2kb）
KOD FX以及KOD-Plus-系列等通常用于PCR的引物可直接使用。由于长链目的片段也可扩增，扩大了引物的选择范围。
2kb以内的各种长度目的片段均可选择，因此可在大范围内进行融解曲线分析。可以选择引物二聚体的产生范围以外的扩增区域（短链区域），对于用end point法进行的多重分析、multiplex PCR有很好的效果。
用植物裂解液、鼠尾热碱抽体液等粗样品可直接检测。运用SYBR® GreenⅠ检测法，能简化繁琐复杂的多型分析及SNP分析。
①扩增长度不同的基因分型检测
通过改变两种扩增产物的扩增长度，只需引物的Tm值设计成不同，即可在单管中进行mouse tail的基因分型。（参照特征1）。
②使用粗样品进行检测
对于用以往使用Taq DNA polymerase的PCR试剂难以扩增的粗样品也可以进行检测分析。
特征3. 对GC含量70%以上的目的片段很有效
对于GC含量70%以上，用以往产品难以扩增的目的片段，也可定量检测。
特征4. 高特异性
通过抑制引物二聚体等非特异性反应，在低拷贝区域也可进行广泛的定量检测。同时通过使用本公司荧光定量PCR用cDNA合成试剂盒「ReverTra Ace® qPCR RT 系列」，可以进行稳定的检测。
特征5. 适用于各种仪器
除了模块型仪器（也适用于Fast Mode），也适用于使用毛细管的高速循环仪。另外，由于另附了50×ROX reference dye，对需要passive reference的仪器也可以使用，适用于各种仪器的ROX浓度。
【适用仪器一览】
| 厂家 |
型号 |
| Applied Biosystems | ABI PRISM® 7000/7700 |
| Applied Biosystems 7300 | |
| Applied Biosystems 7500/7500 Fast | |
| Applied Biosystems 7900HT | |
| Applied Biosystems StepOneTM/StepOnePlusTM | |
| Bio-Rad/MJ | MiniOpticonTM |
| CFX96 TouchTM | |
| Roche Diagnostics | LightCycler® 1.x / 2.0 |
| LightCycler® Nano | |
| LightCycler® 480 | |
| Agilent Technologies | Mx3000P / Mx3005P / Mx4000 |
| TaKaRa | Thermal Cycler Dice® Real Time System |
| BioFlux | LineGene |
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文献和实验几个复孔，选择重复性好的 CT 值参与计算。 （2）CT＜30，重复性较差。这种情况一般同操作有关。 解决办法：从以下几个方面进行问题的排查：①加样准确度；②移液器吸取液体的准确度；③定期校准 qPCR 仪。 ①加样准确度 避免小体积加样，减少加样误差。可以将引物、SYBR Green Mix、ddH2O 配置成混合体系，并且增加模板的稀释梯度，大体积加样。如：原液 cDNA 添加 1μl，可以更改为原液 cDNA 稀释 5 倍，添加 5μl，使用 ddH2O 补齐体系至 20μl 即可
PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束
成功做完了逆转录，这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多，即使使用了 qPCR 预混液，也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列（Q411 /Q421 /Q431 /Q441）提供不同颜色的试剂，利用移液过程中的变色效应，追踪移液过程，可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时，引物设计需遵循以下原则：引物长度 18～25bp，产物长度 80～300bp，GC 含量 40～60
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