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- 保质期:
1年
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10000
- 供应商:
上海信裕
- 保存条件:
室温保存
产品包装:试剂盒组成 D1800-50 D1800-100 储存条件蛋白质银染试剂盒
RNase A 1ml 2ml -20℃
蛋白酶K 1ml 2ml -20℃红细胞裂解液 120ml 120ml×2 RT
溶液A 15ml 2 5ml RT溶液B 15ml 25ml RT
漂洗液 15ml 15ml×2 RT洗脱液 15ml 30ml RT
吸附柱 50个 100个 RT收集管 50个 100个 RT说明书 1份 1份 RT
蛋白质银染试剂盒注意事项:
1、本试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。
2、常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制备大分子量血液基因组DNA,可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时,有PCR扩增抑制现象。
3、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DN**段较小且提取量也下降。
4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。
5、绝大多数哺乳动物的全血如人全血中的红细胞无核,故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞,以免影响白细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量减少为5-20ul,不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。
蛋白质银染试剂盒6、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul,体积过小会影响回收效率;洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的 pH值调至此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。
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文献和实验基于质谱的蛋白质鉴定,第6节:MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
胶样质谱鉴定过程中,多肽的回收是一个问题。如下图所示,将胶样中同样的20 ng兔骨骼肌肌动蛋白用不同的染色法进行染色:常规银染色(无戊二醛)与锌-咪唑锌阴性染色法。染色后,用胰蛋白酶在凝胶中对蛋白质进行消化,磁珠法对样品进行浓缩,用MALDI-MS进行蛋白质谱鉴定。结果发现,与阴性染色的蛋白质相比,蛋白质的银染色导致胰蛋白酶肽的回收率降低(比较图中左右两边肽的S / N比率)。该影响可通过去除蛋白质染色过程中银染试剂的方式消除。 图注:20 ng (500 fmol)兔骨骼肌肌动蛋白经胰酶
用PlusOne蛋白银染试剂盒染Ettan DALT凝胶的优化方法... 98 参考文献... 99 其它读物和参考材料... 104 推荐的其它耗材... 104 订购信息... 105
膜, 0.45um,30cmX3m/卷美国Gelman2310元/卷 尼龙膜, 0.45um,20cmX15cm美国Gelman90元/张 尼龙膜, 0.45um,直径100mm,50张/盒国产260元/盒66543PVDF膜, 0.45um,30cmX3m/卷美国Gelman1690元/卷 PVDF膜, 0.45um, 直径100mm,50张/盒国产260元/盒(三)蛋白质的显示(大部分实验不需要进行此步操作) 蛋白质染色的染料有很多种,各种的特点均不一
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