Rh123试剂(罗丹明123），线粒体ATP检测-绿色

规格

特性：该产物为红色至红棕色粉末或固体，可溶于二甲基亚砜和甲醇。

NMR光谱：试验成功

溶于甲醇：试验成功

荧光染料罗丹明123（Rh123）是一种可对活细胞线粒体染色的细胞染色试剂。Rh123可透过细胞膜且在活细胞的线粒体内聚集，并发出黄绿色荧光。Rh123用于对许多种细胞进行染色，包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相关性，此荧光染料被应用于检测细胞内的ATP。Rh123还用于癌症研究。

λex=507 nm, λem=529 nm

染色步骤

1. 将0.4mg Rh123溶解到1ml DMSO中制备成1mM Rh123-DMSO溶液。

2. 用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×10⁴-5×10⁵个/ml。

3. 孵育该载玻片，用PBS或Hank's液洗涤细胞。

4. 用培养基稀释1 mM Rh123溶液以制备1-20 µM Rh123缓冲液。

5. 将Rh123缓冲液^a) 加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。

6. 去除Rh123缓冲液并用培养基洗涤细胞。^b)

7. 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。

a) 加入细胞前将Rh123缓冲液放在37℃下孵育。

b) 洗涤细胞后为了固定，加入10%福尔马林缓冲液并孵育15-20分钟，接着用PBS洗涤。

【注意】

该产品通常以薄膜形式附着在管的底部。

在极少数情况下，由于运输过程中的振动，该产品可能会从管子的底部脱落，并粘附在管子的壁表面或盖的背面。打开之前，请先将内容物放下。

1) L. V. Johnson, M. L. Walsh and L. B. Chen, "Localization of mitochondria in living cells with rhodamine 123.", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1980, 77(2), 990.

2) C. S. Downes, M. J. Ord , A. M. Mullinger, A. R. Collins and R. T. Johnson, "Novobiocin inhibition of DNA excision repair may occur through effects on mitochondrial structure and ATP metabolism, not on repair topoisomerases", Carcinogenesis, 1985, 6(9), 1343.cytes", Biochem. Biophys. Res. Commun., 1997, 236, 738.

Q1:使用Rh123的示例

A1：1）将细胞放在盖玻片上，孵育过夜。 2）如果您想治疗药物，请在此时进行。 =>用PBS清洗两次后，用化学药品处理。 3）用PBS洗涤两次后，添加Rh123。 =>首先，制成1 mg / mL DMSO溶液，并使最终浓度为0.1-0.02μg/ mL。 4）反应1小时（37℃）后，用PBS洗涤两次。 5）用10％中性福尔马林修复。 （无需强行修复。它似乎可以防止清洁时脱皮） 6）风干后，用甘油等样品 它基于J. Cell Biol。，133，211-220（1996），但已进行了一些更改。

Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。

A2：