- ￥990
- eBioscience
- 65-0865-14
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- 2026年04月03日
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- 英文名：
eBioscience™ Fixable Viability Dye eFluor™ 780
- 库存：
4
- 供应商：
研卉生物
- 规格：
100T
流式死细胞标记染料，eBioscience™ Fixable Viability Dye eFluor™ 780
Fixable Viability Dye eFluor™ 780 是一种活性染料，可在低温冻存、固定和/或透化程序前不可逆地标记死细胞。与 7-AAD 和碘化丙啶不同的是，使用 Fixable Viability Dye 标记的细胞可进行洗涤、固定、透化和细胞内抗原染色，而不会降低死细胞的染色强度。因此，在研究细胞内靶标时，使用 Fixable Viability Dye 可将死细胞从分析中排除。Fixable Viability Dye 可用于标记所有物种的细胞。
Fixable Viability Dye eFluor™ 780 可被红色 (633 nm) 激光谱线激发，发射峰值为 780 nm，可使用 780/60 带通滤光片（相当于 APC-eFluor™ 780 或 APC-Alexa Fluor™ 750）检测。请确保您的仪器能够检测该染料。对于补偿，建议使用经 Fixable Viability Dye 染色的感兴趣细胞样品。如果预期死细胞的百分比低于 5%，则建议取出小份细胞等份试液并以 65°C 加热 1 分钟，随后立即放在冰上 1 分钟。进行上述处理后，加热灭活的细胞可与活细胞以 1:1 混合并使用 Fixable Viability Dye 进行染色。我们的检测表明，来自大多数检测器的补偿可忽略不计，来自 PE-Cyanine7 的补偿较高，低于 5%。实际补偿值将取决于各研究者的特定仪器、滤光片组和 PMT 电压设置。
Fixable Viability Dye eFluor™ 780 以在高质量无水 DMSO 中制备的预稀释溶液提供。储存时应避光防潮。使用干燥剂在 -70°C 下储存。可冻融多达 20 次。打开前将小瓶温度平衡至室温。
已报告应用
流式细胞分析
⇒ 死细胞的非特异性染色
⇒ 细胞的背景增高，影响检测的灵敏度例
⇒ 死细胞染色影响正确的结果比例
与传统染料PI、7-AAD相比有何优势？
⇒ 适用于胞内染色的死活细胞鉴定—— 固定、破膜以及洗涤步骤不影响Fixable Viability Dye的染色，而PI、7-AAD的染色通常是放在其他抗体孵育完成后进行，不能洗涤即要上机检测；对于胞内抗体的染色，由于经过了固定步骤，经过PI或7-AAD染色后所有的细胞都是阳性，所以他们只适合于胞膜染色的死活细胞鉴定
⇒ Fixable Viability Dye的光谱多样，适合各种染色组合的搭配
 | Fixable Viability Dye eFluor® 450 |
| Fixable Viability Dye eFluor® 506 | |
| Fixable Viability Dye eFluor® 660 | |
| Fixable Viability Dye eFluor® 780 |
eBioscience Fixable Viability Dye使用原理
—— 氨基反应性染料，与细胞表面或者内部的蛋白不可逆的结合
| 未标记的空白细胞 |  | 无荧光 |
| 标记后的活细胞只能染上表面蛋白 | 中等强度荧光 | |
| 标记后的死细胞表面和内部的蛋白都染上 | 高强度荧光 |
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文献和实验LIVE/DEAD® Violet Viability/Vitality Kit
than its parent compound. The calcein violet AM ester is colorless and non fluorescent until hydrolyzed. The polyanionic dye calcein violet is well retained within live cells, producing an intense uniform violet fluorescence in live cells (ex/em 400/452 nm
in multicolor immunophenotyping experiments that incorporate a LIVE/DEAD® fixable dye by following the protocol outlined below: 1) Gently vortex the ArC™ Amine Reactive Beads Kit and the AbC™ anti-Rat/Hamster Bead Kit components for 30 seconds
染色带来的影响我们才能更好的做好流式实验。固定对荧光染料的影响是什么？主要表现在固定剂对串联染料（tandem-dye，如 APC/Cy7、PE/Cy7 等）的影响：一个是固定剂有可能造成串联染料的断裂，比如 APC-Cy7 和 4%PFA 接触时间超过 4 个小时染料就有可能断裂，所以如果细胞直接重悬在固定液里面建议尽快上机，如果要放到第二天上机，需离心去除固定液后重悬在流式染色液或者是 PBS 里面，当然有一些新的串联荧光素可以有效减少这种情况，比如 BioLegend 的 APC/Fire750TM
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