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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
磷酸钙转染试剂盒
- 库存:
2
- 供应商:
上海研卉生物
- 规格:
75 rxns
磷酸钙转染试剂盒,K278001
工作原理
用于将 DNA 引入哺乳动物细胞的磷酸钙转染方法的基础是形成磷酸钙 - DNA 沉淀。磷酸钙可促进 DNA 与细胞表面的结合。DNA 然后通过内吞作用进入细胞。该方法首先由 Graham 和 van der Ebb 开发,后来由 Wigler 进行了修改。该程序常用于转染多种用于瞬时表达或产生稳定转化体的细胞类型。将 DNA 直接与 CaCl2 浓缩溶液混合,然后逐滴加入磷酸盐缓冲液中以形成精细沉淀。加入 DNA-CaCl2 溶液的同时对磷酸盐缓冲液通气有助于确保形成尽可能精细的沉淀,这一点非常重要,因为聚集的 DNA 不会有效地粘附到或进入细胞。
2 × 12 ml 2X HEPES 缓冲盐水 (HBS)
3 × 1 ml 2 M CaCl2
20 μg pcDNA™ 3.1/His/lacZ
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文献和实验效率,从而可以间接提高转基因克隆技术的效率。原代细胞难以转染是公认的问题,因此选择一种合适的转染试剂,提高原代细胞的转染效率,是后续阳性细胞的筛选、核移植试验以及转基因动物产生的重要前提。目前最为常用的转染方法有脂质体转染法、磷酸钙转染法、电穿孔法、病毒介导的转染等。据报道病毒介导的细胞转染技术是目前常用的转染方法,慢病毒载体可以作为一种有效的基因运载工具,并能够在胞内稳定表达。阳离子脂质体作为一种有效的基因传递载体具有下列特点:对细胞类型有选择性,转染效果随细胞类型变化大,对 DNA 的质量要求高,但操作简便
),还是等大特价吧。 其他类型的DNA转染产品 一个人多年形成的习惯,是很难改变的。习惯的力量有多大?在脂质体、多胺类转染试剂大行其道的今天,古董级的磷酸钙和DEAE瞬时转染产品依然在 Stratagene买得到,因为有人就是喜欢。当年Clontech推出了创新的SMART技术的建库试剂盒后要取消原来的马拉松建库试剂盒(从这个名字就可以想象这个Kit的操作有多么艰苦漫长),竟然遭到很多老用户的强烈反对,最后继续保留到今天。Stratagene的MBS Mammalian
转染复合物的有效形成 及转染的进行。核酸纯化世界第一品牌德国QIAGEN 公司提供的超纯质粒抽提 试剂 盒,能达 到两倍2x CsCl 梯度离心以上的纯度效果,使您不必为DNA 质量操心。此外,对一些内毒素 敏感的细胞(如原代细胞,悬浮细胞和造血细胞),QIAGEN 还提供可去除内毒素污染的质 粒抽提试剂盒,在质粒抽提过程中有效去除脂多糖分子,保证理想的转染效果。 5.转染技术 转染技术的选择对转染结果影响也很大,许多转染方法需要优化DNA 与转染试剂比例, 细胞
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