相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃冻存
该法是已知的被引用最多的蛋白质定量方法。在酒石酸存在条件
下,碱性硫酸铜的二价Cu2+
与蛋白作用被还原生成一价Cu+
。Cu+ 与蛋白质
肽键形成蓝色的四元复合物(双缩脲反应),加入菲林酚红试剂后,使
浅蓝色变成深蓝色,最后在750nm检测该颜色反应的吸光值,与标准对照
计算出蛋白质的浓度。本试剂盒采一种改进的稳定碱性铜试剂代替经典
Lowry法的Reagent A、B、和C。这种铜试剂在室温下稳定至少6个月;反
应蛋白复合物颜色在120分钟内的变化不超过0.3%;反应曲线几乎100%与
经典方法吻合。
特点:
稳定可靠,是稳定的终点法检测,也是已知的被引用最多的蛋白质定量方法。
比Coomassie更准确,蛋白间差异更小。
检测的线性范围1-1500μg /ml。
使用方法:
样品数量较少时可采用分光光度计测定,样品数量较多时采用酶标仪可大大提高检测效率,详细的实验步骤参见产品
说明书。
使用建议:
该反应20~30min即可达到饱和,需要把握Folin酚红试剂的加入时机,分析时间较长,不适合多个样品同时处理。
Lowery法测定蛋白浓度容易受到还原剂、金属离子,鳌合剂碳水化合物,甘油,Tris 以及K
+等非蛋白物质的影响;含
EDTA,Triton X-100,ammonia sulfate 等物质的蛋白不适合此种方法。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同,需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大,大家可以根据具体情况选取。Bradford法(考马斯亮蓝法):考马斯亮蓝G
发光基团pNA游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1.准备工作: A、 裂解液溶解后混匀,冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备:每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT,冰浴备用。 2.样本处理: A、悬浮细胞 1) 诱导完成后的细胞,2000 rpm离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS轻轻重悬细胞并计数
真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
。 2)RNA 提取 外泌体 RNA 可以用专用的外泌体 RNA 提取试剂盒提取,也可以用 Trizol 法提取,建议 Trizol 与外泌体的体积比不小于 4:1(也可以用 Trizol 直接裂解外泌体沉淀)。 具体操作:取 200 μl 外泌体于 1.5 ml EP 管中,加入 800 μl Trizol 试剂,充分混合,裂解 10 min,12000 rpm 离心 10 min 取上清。 3)反转录 采用 Umibio 4× 预混型快速逆转录试剂盒:适用于长片段 RNA(如 mRNA、LncRNA
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










