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特点:
简便:直接用血液为模板扩增目的基因,无需事先提纯(图例一)
高效:有效减少了杂带产生,从而实现高特异性的PCR.
稳定:经测试,反复冻融4 0 次后,扩增性能仍不受影响。
产品用途:
1)直接用血液为模板进行PCR扩增目的基因,可进行血液相关基因疾病的快速诊断;
2)基因组扩增检测;
使用建议:
建议使用时添加<=10%的全血为模板,加上血液后建议用涡旋器将管中各组分轻轻混匀。
常用反应体系(25μl)
2×HaemoMaster Mix 12.5μl
上游引物 0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物 0.2-1.0μM(终浓度)
全血 0.1-2.5ul
ddH2O 至25μl
*Mg2+终浓度为3.75mM
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文献和实验5. 不受粘末端或平末端的限制6. 超简洁反应体系配制:只需将克隆片段与线性化的载体按一定比例加入Lightening Assembly Master Mix即可7. 超快速:克隆连接反应只需10-15分钟较传统克隆方法,操作步骤更少,所需试剂更少,所需时间大大缩短。8. PCR产物可直接与表达载体连接,无需酶切或连入克隆载体。应用范围:1. 平末端和粘末端DNA片段克隆。 2. 1到多个DNA片段克隆。3. 点突变。 4. 长片段克隆。5. DNA片段上有和载体相同的酶切
非特异性扩增的概率降到最低,想出了这种只有在高温下经过一定的时间才能激活并释放活性的酶—热启动酶。 热启动酶多用两种修饰方式:化学修饰和抗体修饰。 例如: Vazyme 的 ChamQTM QPCR Master Mix 中的 Champagne TaqTM DNA Polymerase 是经过抗体修饰的 Taq DNA Polymerase,95 ℃ 加热 30 sec 就可以灭活抗体激发酶活。AceQ® QPCR Master Mix 中 AceTaq®DNA Polymerase 是经过化学
的PCRMIX,是目前最“傻瓜”的 PCR 反应体系之一,不论是质粒、菌液、CDNA、基因组 DNA、或者是直接裂解的粗提物,GC 含量高达 75% 的模板,都能轻松扩增,不需要费力的“摸条件”! 本产品包含酶、dNTP、特殊稳定剂和优化的反应缓冲液,浓度为 2x。DNA 扩增时,只需加入模板,引物和水,使 MasterMix 溶液的浓度为 1× 即可进行反应。具有快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行 PCR 扩增可以减少操作时间,避免因多步操作带来的污染,特别适宜高通量筛选基因的扩增
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