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X-Gal 5-溴-4-氯-3
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有效期2年
X-gal
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
大量
-20℃避光保存
1g/5×1g
X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。基于这个特点,当pUC系列载体DNA以lacZ 缺欠细胞作为宿主进行转化时,或M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在培养基中加入X-Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色而方便地挑选择出基因重组体。
常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。运输与保存方法
冰袋运输。-20 ℃避光保存,有效期2年。
产品性质
中文名称(Chinese Synonym)
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷
英文名称(English Synonym)
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside;
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside
CAS号(CAS NO.)
7240-90-6
分子式(Molecular Fomular)
C14H15BrClNO6
分子量(Molecular Weight)
408.63 g/mol
外观(Appearance)
白色至浅黄色粉末
纯度(Purity)
>99%
溶解性(Solubility)
溶于DMSO,溶解度可达20mg/mL。也溶于DMF。
结构(Structure)
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
2)含有 X-Gal 的培养基 4℃避光保存,须在1周内使用。
3)本产品仅作科研用途!
配制储存液
称取200 mg X-Gal于15 mL 离心管,向其中加入10 mL DMF,旋涡震荡使其充分溶解后于-20℃避光保存,正确操作下,有效期可达5-12个月,如小量频繁使用,建议分装成1 mL/管后避光冻存。
蓝白斑筛选
1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液
1)高压灭菌已加琼脂的培养基,并冷却到50℃左右。
2)每毫升培养基内加入10 μL 20 mg/mL X-gal溶液、10 μL 0.1 M的IPTG(使其终浓度达到1 mM);
3)加入适量抗生素;
4)混匀后按照平板大小倒入适量培养基,待培养基冷却至室温后,接种细菌于37℃过夜培养。
2. X-Gal、IPTG加到琼脂平板表面
1)于无菌超净工作台制备平板(如LB 琼脂板);
2)取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合,均匀地涂布于准备好的平板上;注:平板边缘较难充分涂布均匀,容易产生假阳性,因此,为了得到更好结果,建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。
3)37℃孵育直至所有液体被吸收(30 min或更长)。接种细菌于37℃过夜培养。
HB211112
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