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细胞凋亡指标检测
细胞凋亡送检服务报价及说明
| 实验项目 |
客户提供材料 |
服务 周期 |
提交结果 |
服务报价 |
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| AnnexinV-FITC检测 |
细胞 （需达到1×105的细胞/实验） |
3天 |
荧光显微镜观察或流式细胞仪分析 |
100元/样 |
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| AnnexinV-EGFP检测 |
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| TUNEL细胞凋亡原位检测 （Biotin标记，DAB显色） （FITC绿色荧光， TRITC红色荧光） |
预实验 |
细胞涂片、组织石蜡切片、冰冻切片 |
2周 |
光学显微镜拍照或荧光显微镜照片 |
800元/套（含阴性、阳性对照） |
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| TUNEL 实验 |
细胞涂片、组织石蜡切片、冰冻切片 |
2-4周 （视样本数而定） |
光学显微镜拍照或荧光显微镜照片 |
200元/样 |
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| Caspase 3、8、9单项检测 |
细胞 （需达到3-5×106细胞/实验） |
1周 （视样本数而定） |
蛋白定量结果 及吸光度值 |
100元/样 |
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| 线粒体膜电位检测（JC-1法） |
细胞 （1×105-1×106的细胞/实验） |
3天 |
荧光显微镜观察或 流式细胞仪分析 |
100元/样 |
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| 细胞DNA含量（细胞周期）检测 |
细胞 （需达到1×106的细胞/实验） |
3天 |
流式细胞仪 分析结果 |
100元/样 |
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| 端粒酶 活性检测 |
TRAP-PCR银染法 |
1-2×106的细胞或0.5g组织 |
2周 |
PAGE胶银染结果 |
500元/样 |
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| 荧光定量PCR法 |
1-2×106的细胞或0.5g组织 |
2周 |
荧光定量结果 |
600元/样 |
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相关知识：根据样本主要分成动物组织石蜡切片、冰冻切片和培养细胞3部分。
① 动物组织石蜡切片/冰冻切片
样本接收：可以是固定好的组织或者包埋好的蜡块。（建议客户自己包埋组织，一方面方便运输；另一方面对于所要的部位以及包埋的方向也最为清楚）
样本信息：在取样本的同时，或者是操作之前，需要了解样本的具体信息
（包括1、每个样本的具体分组；2、该实验的模型；3、预想的趋势；4、对于视野的选择有没有特殊的要求）
检测时间：1、组织包埋、切片（一般一周左右）
2、预实验需要1～2周，正式实验需要1～2周。
实验结果：先发预实验，包括染色照片、数据分析（没有阳性表达的没有分析）
最后会有详细的操作步骤、检测报告以及数据分析。
② 培养细胞
目前做培养细胞的凋亡检测，一般用流式细胞仪做。
由于细胞培养用药都有时间点的要求，所以需要及时的收集细胞，并进行处理，一般需要客户将培养过程中的细胞带到实验室，到时间点后直接收集细胞并处理。（考虑客户不常做这方面，流式细胞仪做细胞的凋亡检测对于细胞收集要求较高，一旦收不好会影响测定结果）
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文献和实验References [1] Danise P, Amendola G, Di CR, et al. Nucleated red blood cells and soluble transferrin receptor in thalassemia syndromes: relationship with global and ineffective erythropoiesis. Clin Chem Lab Med. 2009. 47(12): 1539-42. STABLE
相关专题 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜 脂质双层的内侧，细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。 在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核 的变化，而此阶段Propidium Iodide
在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的变化，而此阶段Propidium Iodide（PI）不能通过细胞膜。细胞坏死时，虽然也会发生磷脂酰丝氨酸外翻，但此时细胞膜的通透性明显
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