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- 2025年12月14日
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流式细胞仪检测
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凯基生物
| 流式细胞仪检测 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段，它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，与传统的荧光镜检查相比，具有速度快、精度高、准确性好等优点，成为当代zui先进的细胞定量分析技术。 |
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文献和实验细胞凋亡的检测方法众多，流式细胞仪检测凋亡，是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此，具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下，首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体，线粒体的功能发生衰退；后是caspase家族激活，磷脂酰丝氨酸外翻，这时细胞的形态已经发生了改变，可以看到细胞变小，胞核皱缩；最后是细胞内DNA断裂，形成凋亡小体。在凋亡发生的各个过程当中，都有相应的流式细胞仪的检测方法，可以采用
。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清。 5．细胞悬液中加入500 μL JC-1染色工作液重悬细胞。37°C，5%CO2培养箱中孵育15-20 min。 注：培养温度与细胞类型有关，一般哺乳动物细胞建议37°C，其他种属根据细胞培养条件选择合适的温度。 6．300 g离心5 min，弃上清，加入500 μL预冷的1x JC-1 Assay Buffer洗涤2次。 7．加入500 μL预冷的1x JC-1 Assay Buffer重悬细胞。 8．样本置于冰上保存，30 min内用流式细胞仪检测。 三
一、实验材料NCI-H1299，购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家（货号）细胞培养瓶FALCON 中国（353014）Penicillin/streptomycin solution（KGY002）0.25% Tripsin-EDTA（BK-E3076）PBS（BK330-2）胎牛血清GIBCO 美国（10270-106）1640 培养基Hyclone 美国（SH3080901）Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
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