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- 江苏南京
- 2025年12月16日
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腺/慢病毒包装与感染
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凯基生物
| 腺/慢病毒包装与感染 | |
| 实验目的：利用病毒载体将目的基因携带进入细胞以获得稳定转染的细胞株 实验原理：慢病毒包装系统：该系统包含1个慢病毒载体质粒和3个包装质粒。慢病毒载体带有病毒表达的基本骨架；3个包装质粒分别表达病毒包装的必需蛋白—— Gag/Pol、Rev和VSV-G。四质粒共转染293T包装细胞，以包装出慢病毒颗粒。腺病毒包装系统该系统包含1个穿梭载体和1个辅助载体。慢病毒穿梭载体带有外源基因表达盒以及包装信号；辅助载体含有大部分的腺病毒骨架，同时可以表达Cre重组酶。两质粒共转染293细胞，即可发生重组，包装出腺病毒颗粒。 实验仪器：生物安全柜、生物倒置显微镜等 实验内容与方法： 1. 确定基因序列，引物设计与合成 2. 质粒构建，病毒包装，检测 客户提供实验信息： 1、实验信息（客户提供）： 样品信息 （包括来源、全称等） 2、实验材料提供 （1）样本材料 病毒载体，目的基因的序列以及其他特殊材料 （2）试剂 服务周期： 10-12周 结果提交：提交实验报告书（实验试剂与设备、实验过程、 结果分析、原始数据、细胞图片等）； 客户定制的病毒产品，测序引物、测序结果和载体图谱 |
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文献和实验hetingcopy 大家好，我现在正在做慢病毒包装，用的是CLONTECK的包装系统，第一次感染293T细胞后，荧光很亮，48H后收集病毒上清，离心后冻于-80度，一天后感染靶细胞，什么都没有？请问大家是怎末做的？谢谢。 大鹏鸟 看到荧光并不代表包装成功,它代表的只是你的质粒转进去了。做慢病毒包装时必须要搭配好几个质粒的比例。转染之后要能看到细胞形态的病变。收集上清的时候要注意尽快分装保存。有可能的话最好把细胞也裂解一下
HPV 并不是宫颈癌唯一的「元凶」？这种微生物化身「帮凶」，共同促进癌症发生
E7 癌基因的慢病毒转染 hCEcto（human ectocervical，人子宫颈）上皮干细胞，将 E6E7 整合到宿主细胞基因组中。结果发现，HPV16 E6E7 整合到外宫颈类器官中会诱导一种具有子宫颈上皮不典型增生（CIN，被认为是癌前病变）特征的表型。 图片来源：Nature Communications 因此，这种宫颈类器官模型的构建为研究 HPV 和共感染生物学开辟了一条途径。 沙眼衣原体与 HPV 合并感染引起独特的转录反应 为了探究宫颈中沙眼衣原体和 HPV 共感染
相关专题 慢病毒包装技术专题 慢病毒(Lentiviruses)属于逆转录病毒科。慢病毒核蛋白质前整合复合物具有噬核特性，病毒基因组运输至细胞核，从而使慢病毒可以感染和在非有丝分裂细胞中复制。这一特性使慢病毒成为基因治疗的转移载体 。 HIV (Human immunodeficiency virus) 、EIAV (Equine infectious anemia virus) 、 FIV (Feline
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