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- 本公司应用MTT比色法， 检测细胞存活和生长。其检测原理为活细胞内线粒体中的琥珀酸脱氢酶能催化外源性无色的MTT形成蓝色的结晶Formazan，并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。
- 2025年07月12日
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赛戈（上海）生物科技有限公司
服务介绍
细胞增殖检测
本公司应用MTT比色法， 检测细胞存活和生长。其检测原理为活细胞内线粒体中的琥珀酸脱氢酶能催化外源性无色的MTT形成蓝色的结晶Formazan，并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的Formazan，用酶联免疫检测仪在一定波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。
该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验、以及肿瘤放射敏感性测定等。
服务内容
1. 细胞接种：收到客户细胞后，我们会用细胞计数板计数细胞，得出细胞悬液浓度。计算出应稀释的倍数，按MTT试剂盒要求在96孔板内接种 相应浓度的细胞悬液；
2. 细胞培养：然后在无菌恒温细胞培养箱内培养接种好的96孔细胞培养板，并实时观察细胞状态；
3. 药物处理并呈色：按不同浓度梯度加入药物作用细胞；
4. 溶解，比色：加入MTT检测试剂，按操作要求孵育相应时间，在酶标仪内检测对照组和实验组的吸光值。并处理数据得出比色结果。
服务说明
1. 客户提供：活力旺盛的细胞和待检测药物（如需公司提供请说明）；
2. 实验周期：1-2周（视具体物流而定）;
3. 若另有疑问欢迎向本公司咨询，我们将竭诚为您服务。
质量承诺
1. 真实的原始实验数据；
2. 权威的实验报告；
3. 详细的实验步骤。
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文献和实验willion1985 直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一，是测定物质毒性、评估药物安全评价、细胞健康的基本方法，其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类似物----BrdU进行检测。因为在细胞周期的S期，和细胞一起孵育的BrdU能渗入DNA分子中，再结合BrdU抗体与渗入DNA的BrdU特异性结合，就能够检测到DNA复制活跃的细胞。 但BrdU有一大缺点，就是需要变性DNA后才能与抗体结合，但这就破坏了DNA双链结构，影响了其他染料的结合
5-brdu 的分子量为307.1，将100mg分为三份30.7mg（0.1mmol），溶于1ml三蒸水，分装-20度保存。用的时候再稀释100倍，如在1ml溶液里加入10ul即可。尽量分装为小剂量，如100ul，避免反复冻融使其活性降低。1、BudR贮存液的配制BudR 5mg（先用0.5ml 1N NaOH溶解）然后加蒸馏水至5ml，即成1000ug/ml的贮存液，因BudR遇光会发生分解，贮存液需置棕色瓶并黑纸封瓶避光冰冻保存。 一般用的是用10μg/ml终浓度。2、终止细胞培养前，加入
一、原理荧光染料CFSE， 也可称为CFDA SE（5，6- carboxyfluorescein diacetate，succinimidyl ester） 即羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂，是一种可穿透细胞膜的荧光染料，具有与细胞特异性结合的琥珀酰亚胺脂基团和具有非酶促水解作用的羟基荧光素二醋酸盐基团，这使得CFSE成为一种良好的细胞标记物。当CFSE以含有两个乙酸基团和一个succinimidyl ester功能基团的形式存在时，不具有荧光性质，而具有细胞膜通透性，能够自由进入细胞
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