Vero细胞(无圆环病毒污染、保成活)

Vero(非洲绿猴肾细胞)培养指南

Vero(非洲绿猴肾细胞)培养指南 　　Vero细胞由日本千叶大学的Yasumura和Kawakita从正常成年非洲绿猴肾脏建株，1964年带到NIH时已传至第93代，是目前科研中广泛使用的经典细胞系。 　　细胞特性与应用场景 　　该细胞应用广泛，可用于Vero毒素检测、绞牛肉中的病毒检测、功效测试、疟疾研究、培养基测试和支原体检测，也是一种合适的转染宿主和疫苗生产常用细胞。 形态特征与生长方式   　　贴壁生长，呈上皮细胞样（卵圆形或多边形），贴壁依赖性较强，传代时需用胰酶充分消化，一般消化

vero（非洲绿猴肾细胞)的传代

传代步骤比较传统：倒掉培养液－>PBS洗2遍－>胰酶0.25%消化－>倒掉胰酶－>加培养基－>用吸管吹打均匀－>分瓶－>放置37度，5%CO2孵箱。我的体会是：1、消化时间和实验环境温度也有很大关系，我们实验室条件比较差，不能维持恒温（不过我想大部分实验室目前也还是做不到的）。夏天的时候，消化特别快。但是到了冬天，就很慢，要用手捂老半天。2、消化到什么程度可以，经验很重要，如果每瓶消化都要通过显微镜观察来判断，首先效率太低，而且还很容易消化过头。对光观察培养瓶，当感觉到有些泛白，瓶角有少许细胞

vero（非洲绿猴肾cell)的传代

vero（非洲绿猴肾cell):贴壁细胞，以25ml小方瓶为例，培养液用的是MEM。 MEM的配制：10%小牛血清，1%双抗，3%谷氨酰胺，1~1.5%NaHCO3. 传代方法： 1、倒掉培养液，如果细胞脏的话可用PBS洗两次，否则不用。 2.、胰酶0.25%2ml消化1~3分钟，容易消化. 3、倒掉胰酶，加MEM9~12ml,将贴壁细胞摇至悬浮，并用吸管吹匀，一传三或一传四。 4、置37度，5%CO2孵箱。