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FastStart Universal Probe Master (Rox)
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嵘崴达
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1250 x 20 reactions
FastStart通用探针预混液(Rox)
FastStart Universal Probe Master (Rox)
Application
FastStart™ Universal Probe Master (Rox) has been used:
• in TaqMan® quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) reactions for the quantification of endogenous miRNAs, such as MIR376B, MIR376A and MIR181A
• in reverse transcriptase (RT-PCR) to study tumor necrosis factor (TNF) expression in whole synovial tissue of undifferentiated peripheral inflammatory arthritis (UPIA) patients
• for the amplification and detection of any DNA or cDNA target, including those that are GC- or AT-rich by quantitativePCR
Combine this master mix with Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit (Roche) to achieve excellent results in two-step qRT-PCR.
Features and Benefits
• 提高qPCR的灵敏度和特异性。
产生较低的循环阈值(Ct)。
• 将主混合物用于任何基于探针的检测。
使用通用探针库探针或任何其他水解探针的检测中获得灵敏、特异结果。
• 扩增和检测广泛的DNA或cDNA靶。
扩增长度高达500 bp的片段,包括那些富含GC或AT的片段。
• 可视化琼脂糖凝胶上的扩增产物。
• 使用机器人移液站来设置qPCR反应。
在延长的反应设置时间内,使用在室温下稳定的主混合物。
• 防止遗留污染导致的误报。
结合使用这种含dUTP的混合物和尿嘧啶-DNA糖基化酶,消除以前PCR反应中遗留下来的污染性DNA。
Components
快速启动通用探针主机(Rox),2倍浓缩主混合物,包含快速启动Taq DNA聚合酶、反应缓冲液、核苷酸(dATP、dCTP、dGTP、dUTP)和参考染料。
Quality
功能测试:使用三个模板对每批样本进行qPCR性能测试,即富含GC的模板、富含AT的模板和长模板(约440 bp)。
| 4913957001 | FastStart Universal Probe Mast | 10 x 1.25 ml (for 500 reactions of 50 µl final reaction volume) |
| 12032953001 | FastStart Taq DNA Polymerase, DNA聚合酶 | 5,000 U (20 x 250 U) |
| 10735108001 | BSA Fraction V, 1kg | 1 kg |
| 3553400001 | FastStart High Fidelity PCR Sy | 500 U (2 x 250 U) |
| 11388991001 | Agarose MP, 500g 琼脂糖MP | 500 g |
| 10223549001 | Histone H1 组蛋白H1 | 1 mg |
| 11034758001 | Histone H3 组蛋白H3 | 1 mg |
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文献和实验扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书,检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是,需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料,用以校正仪器系统以外的物理误差,比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的,当用此类试剂的时候,应该将 ROX 参比
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等)、miRNA 加尾法逆转录试剂盒做反转录:适用于短片段 RNA(主要为 miRNA)的加尾法。 4)qPCR 检测 采用 Umibio 2×SYBR Green qPCR 试剂:预混 ROX1 型适用于 ABI 5700 等设备、预混 ROX2 型适用于 ABI 7500 等设备。 5)数据分析:采用仪器自带的 QPCR 分析软件进行数据分析 可以看到 qPCR 检测外泌体可行且可靠,但实验过程并不简单,因此我们对经常会遇到的问题及解答也进行了整理,帮助大家更好的完成实验。 qPCR检测外泌常见问题及解决
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