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StarLighter Probe qPCR Mix (Universal)
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北京启衡星生物科技有限公司
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- 规格:
5 ml,4*1.25ml/盒/1 ml,1支/盒
| 规格: | 5 ml,4*1.25ml/盒 | 产品价格: | ¥1200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1 ml,1支/盒 | 产品价格: | ¥300.0 |
StarLighter 探针法 qPCR预混液(通用型)
StarLighter Probe qPCR Mix (Universal)
StarLighter Probe qPCR Mix (Universal) 是一款基于探针法对各种来源的DNA样本进行快速定量、实时分析的通用试剂盒。性能优异的热启动基因工程改造Taq DNA polymerase,配合基于探针法qPCR优化的缓冲液,可以有效抑制非特异性扩增,大大增加qPCR扩增效率,适用于进行高灵敏度的qPCR反应。参比染料ROX随试剂盒提供。
本产品使用前只需要加入引物、模板、探针、ROX(根据使用的机型而定)和水。定量范围宽,可以对靶基因进行准确的定量、定性和SNP检测;本产品具有重复性好,可信度高,并兼容各种不同类型的qPCR探针的特点。
产品优势:
- 扩增特异性强,数据结果可靠;
- 高GC模板扩增能力强;
- 扩增效率高,Ct值提前 ;
- 信噪比高,低copy检测灵敏度高。
- 基因表达分析;
- SNP和等位基因分型;
- 测序和微阵列结果的验证。
利用ARMS-qPCR技术对ApoE两个基因亚型ApoE2、ApoE3进行分型:以携带ApoE3基因亚型的人类基因组为模板,设计两对亚型特异性引物(对应亚型可以扩增,非对应亚型不能扩增。与某竞品平行测试。
ACTB:内参基因;ApoE: 待测基因(片段长度197bp,GC含量71%)
1、扩增特异性强,数据结果可靠

Fig1:使用StarLighter Probe qPCR Mix(Universal)试剂,利用携带ApoE3基因亚型的人类基因组为模板,AopE2没有扩增,AopE3扩增良好,说明StarLighter Probe qPCR Mix(Universal)目的产物扩增特异性好; 竞品未能扩增出高GC片段。
- 高GC模板扩增能力强
| 模板 5ng | Ct值ApoE2 | Ct值ApoE3 |
| StarLighter Probe qPCR Mix(Universal) | >45 | 28.08 |
| 竞品 | >45 | >45 |

Fig2:以人基因组为模板,模板浓度分别为50ng、5ng、0.5ng、0.05ng,扩增ApoE3基因,扩增片段长度197bp,GC含量71%。使用StarLighter Probe qPCR Mix(Universal)试剂可得到有效扩增,而竞品没有扩增出ApoE3(Ct>45)。
- 普通GC含量模板扩增效率高,梯度稀释线型范围好
- StarLighter Probe qPCR Mix(Universal)与竞品扩增内参基因ACTB比较

Fig3:以人基因组为模板,模板浓度分别为50ng、 5ng、0.5ng、0.05ng,扩增内参基因ACTB基因,扩增片段长度179bp,使用StarLighter Probe qPCR Mix(Universal)可有效扩增ACTB基因,扩增效率和R2值均优于竞品。CT值比竞品提前约1-1.5个cycle。
4、低拷贝模板检测灵敏度高

Fig4:以人类基因组为模板,模板起始浓度为100ng,将模板进行5倍梯度稀释,使用StarLighter Probe qPCR Mix (Universal)试剂。当模板浓度低至0.032ng时,内参基因ACTB和目的基因ApoE3仍能得到有效扩增,且起始模板量的log值和其Ct值线性关系良好。
5、高稳定性

Fig5:不同冻融次数对StarLighter Probe qPCR Mix (Universal)试剂的稳定性影响,加入不同起始量模板情况下,不同冻融次数的扩增曲线重复性良好。

Fig6 : 37℃处理5天对StarLighter Probe qPCR Mix (Universal)试剂的稳定性影响。加入不同起始量模板情况下,37℃储存5天试剂的扩增曲线与未经37℃处理的试剂的扩增曲线重复性良好。

Fig7 : 室温处理28天对StarLighter Probe qPCR Mix (Universal)试剂的稳定性影响。加入不同起始量模板情况下,室温处理28天试剂的扩增曲线与未经室温处理的试剂的扩增曲线重复性良好。(本实验在Q6上完成)

Fig8 : 4℃处理43天对StarLighter Probe qPCR Mix (Universal)试剂的稳定性影响。加入不同起始量模板情况下,4℃处理43天试剂的扩增曲线与未经 4℃处理的试剂的扩增曲线重复性良好。(本实验在Q6上完成)
产品在人类基因分型中的应用实例:
实例一
以已知分型的不同个体人类血液提取的基因组为模板,设计ApoE基因亚型特异性引物,使用StarLighterProbe qPCR Mix(Universal),通过qPCR扩增对不同个体携带的ApoE基因进行分型,得到的分型结果与已知分型情况一致。
Table2:不同个体人类基因组ApoE分型
| StarLighterProbe qPCR Mix(Universal)分型 | 已知分型 | ||||
| 样本编号 | 基因型 | rs429358 | rs7412 | rs429358 | rs7412 |
| 201907000001 | e3/e3 | TT | CC | TT | CC |
| 201907000002 | e3/e3 | TT | CC | TT | CC |
| 201907000003 | e2/e3 | TT | CT | TT | CT |
| 201907000004 | e2/e3 | TT | CT | TT | CT |
| 201907000005 | e2/e4 | TC | CT | TC | CT |
| 201907000006 | e3/e3 | TT | CC | TT | CC |
| 201907000007 | e3/e3 | TT | CC | TT | CC |
| 201907000008 | e3/e3 | TT | CC | TT | CC |
| 201907000009 | e3/e4 | TC | CC | TC | CC |
| 201907000010 | e3/e3 | TT | CC | TT | CC |
| 201907000011 | e3/e3 | TT | CC | TT | CC |
| 201907000012 | e3/e3 | TT | CC | TT | CC |
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