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- 服务名称:
构建哺乳动物稳定细胞系
- 提供商:
GeneCopoeia
美国GeneCopoeia现为广大研究者提供稳定细胞系构建服务,使用最先进技术水平,为您提供高质量的稳定细胞系。构建服务可使用复能基因提供的 CHO、HEK293、Hela、NIH3T3等工具细胞,也可使用客户指定的特定细胞系。从克隆构建、细胞系建立、基因扩增、单克隆筛选、细胞系鉴定、到功能研究,全方位的实验选择可满足研究者对蛋白表达、基因沉默等多种科研需求。
选择GeneCopoeia的哺乳动物稳定细胞系构建服务,您可以:
1)自由选择基因插入方式
- 选择随机插入,可通过筛选获得高表达水平的转基因个体
- 选择插入人类AAVS1 safe harbor位点,可降低外源基因对细胞的毒性,并可最大还原基因在正常生理条件下的表达水平
- 选择TALEN介导的外源基因精确插入,可应用于基因编辑或细胞工程
2)自由选择克隆载体
慢病毒载体
- 可快速获得细胞稳定集合体或单克隆
- 成本效益高
- 表达水平高
- 仅限研究使用,请勿用于临床
质粒载体
- 不需构建慢病毒骨架
- 可用于药物筛选或制备治疗级别的蛋白
3)自由选择靶细胞系
- 常用工具细胞系:CHO、HEK293、Hela、NIH3T3
- 客户指定的细胞系
4)自由选择扩增基因或调整蛋白表达量
- DHFR或GS基因扩增系统均可选择
- 可选择增强开放染色质位点的整合性
- 可自由选择启动子,如CMV, EF1α等,调整表达水平
- 使用诱导型启动子,表达易对靶细胞造成毒性的基因
5)自由选择插入基因
- GeneCopoeia是全球最大的基因克隆供应商之一,提供多种即用型ORF表达克隆及shRNA克隆。克隆均经过严格的质量检测及验证
- 可自由选择启动子种类、标签种类、报告基因及筛选标记,满足您的不同科研需求
- 质粒及慢病毒颗粒均可直接用于实验,节省大量实验时间和精力
具体详情,请联系 销售工程师 或 拨打热线电话: 4006-020-200
更多产品信息请点击:http://www.igenebio.com/product/promoter-reporter-clones/
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文献和实验之降解,是在 RNA 水平上的降低目的基因的表达。此时,基因敲除稳转株可以很大程度上规避这个问题。因为基因敲除稳转株是在基因组水平上通过基因序列的改变使其基因功能丧失,在敲除细胞中通常不会检测到靶蛋白的表达,而且敲除效果稳定,不能恢复,也就是永久性敲除了。但是基因敲除稳转株缺点是操作周期长,费用多,效率低。如何选择基因下调表达的方式,就要综合考虑了。那么同样是稳定株,单克隆?混合克隆?要怎么选?细胞:当需要去除细胞群体干扰因素的时候,推荐使用单克隆稳定细胞株,其基因组背景相对单一,对实验
细胞治疗 ③ 免疫原性低:直接注射活体组织不易造成免疫反应,适用于动物实验 5.慢病毒载体应用 5.1 体外感染细胞 慢病毒载体能够有效地感染培养的肿瘤细胞、肝细胞、心肌细胞、神经元、内皮细胞、干细胞等多种类型原代细胞和大部分细胞系。慢病毒的感染具有整合特性,能够将外源基因有效地整合到宿主染色体上,因而可以达到持久性表达,从而构建稳定细胞株,用于基因的细胞功能研究。 体外使用慢病毒感染细胞需要注意,由于每种细胞对慢病毒的敏感性不同,有的容易感染,有的比较难,同时每种慢病毒载体荧光强度也有差异
基因组或者 Panel 范围内的基因调取与 sgRNA 设计 (2)CRISPR-Cas9 载体系统构建 (3)KO/KI 验证与分析 体外 sgRNA 活性验证 体内 sgRNA 活性验证 (4)细胞株或者动物模型构建 稳定细胞株构建 基因敲除动物模型构建 2. 哺乳动物细胞非编码 RNA 功能研究 (1)pg-sgRNA 设计 基因组或者 Panel 范围内的基因调取与 pg-sgRNA 设计 (2)CRISPR-Cas9 pg-sgRNA 文库构建
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