用于Roche 480的硬质裙边384 孔板， Hard-S

99% 的人不知道的 PCR 耗材小机密！

童鞋们都知道，要想成为真正的 PCR 达人，并非易事。一个小小的环节都可能让整个实验挂掉，也正是因此，PCR 成为了资深科研者们心中的痛。 不要说实验本身，其实就连实验的耗材都隐藏着大学问，工欲善其事，必先利其器。 今天我们就具体来说下 PCR 耗材中选择选择反应板的问题。 PCR 板通常采用 96 孔和 384 孔的形式，其次为 24 孔和 48 孔。使用的 PCR 仪和正在进行的应用的性质将决定 PCR 板是否适合您的实验。 裙边 PCR 板的“裙”是板周围的板。裙边可为反应体系构建时

LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析

的定量。 更多有关特定CpG位点的甲基化的详细信息，可采用重亚硫酸氢盐修饰后测序分析。 LightCycler主要应用：实时荧光PCR技术进行快速准确的DNA甲基化分析 我们使用罗氏诊断公司的LightCycler®480高分辨熔解扩增试剂盒在LightCycler®480实时荧光PCR仪上，通过MS-HRM测定法对两种已知的经过启动子（FANCE和MGMT）甲基化的DNA修复基因的检测性能。 材料和方法 将多种细胞株的DNA样本作为检测模板。每μg的每种DNA样本都经过重亚硫酸盐修饰

我的奋斗史：realtime-PCR 达人养成记（上）

7000，其他人都是用 taqman 探针做的，而且只是对结果进行定性分析。 我用的是 SYBR green 染料，是需要做溶解曲线的。关于设置的问题就来了，设置好 PCR 的程序以后，在程序下方有一个框框。具体我忘了，把那个框框打上勾就好了, 溶解曲线的温度是不能高于 60 度的，所以我有部分产物解链温度太高了，出来的溶解曲线只能出来半侧峰或者没有峰。 后来单位又购进了一台 ROCHE 480 lightcycleR 能设置溶解曲线的反应程序，这个问题就解决了。 阈值的调整