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- 提供普通PCR，RT-PCR以及实时荧光定量PCR服务
- 天津
- 2025年07月06日
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- 服务名称：
实时荧光定量PCR
- 提供商：
天津翼骏生物科技有限公司
翼骏天津翼骏生物科技有限公司是由留美学者和国家纳米技术与工程研究院共同出资设立，从事基因组医学临床研究和技术开发的生物技术高科技公司。 公司还提供实验设计、预实验、正式实验、数据整理、论文写作等方面的服务。具体内容敬请垂询本公司。公司网址：www.uni-gene.com。
实时定量荧光PCR
1.样品要求：
| 标本 | 要求 | 用量 |
|---|---|---|
| 细胞 | 新鲜细胞或离心后收集，干冰运输 | 107以上 |
| 血液 | 新鲜血液或抗凝剂处理的全血，干冰运输 | 1ml |
| 组织 | -80℃或液氮储存，干冰运输 | 100mg |
| RNA | OD260/280在1.9-2.1之间，-80℃储存，干冰运输 | >1μg |
| DNA | OD260/280在1.7-1.9之间，-20℃储存，冰袋运输 | >1μg |
| cDNA | -20℃储存，冰袋运输 | >20μl |
2.最终产品：完整的实验报告。
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文献和实验一、荧光PCR原理 1．荧光共振能量传递 (FRET) 某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为FRET。 2．荧光化学： 荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种：荧光探针和荧光染料。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq
提要 基本概念 定量PCR的数学原理 定量PCR的化学原理 等位基因鉴定原理 定量PCR仪光学原理 基本概念 •PCR能否只用一条引物？三条引物？ •PCR能否使用ddNTP？ 典型的PCR四阶段
PCR-SSCP方法分析按照我室常规进行。1.3.3 Taqman荧光探针 以发现的ALAS2基因第五外显子点突变为中心设计，序列如下：5’（荧光集团）FAM-CAAGATCATAGAGAAGAAAC-TAMRA（淬灭集团）3’，设计Taqman荧光PCR反应的上下游引物。序列如下：上游引物：5’-tcagttatgaccagtttttcaggg-3’，下游引物：5’-gaacacacggtaggtgtgatcct-3’。1.3.4 常规实时定量PCR检测ALAS2基因第五外显子基因
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