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文献和实验干燥,或用吹风机冷风吹干且无酸味。再将玻璃板放在流动的自来水下冲洗,当薄膜完全润湿后用单面刀片撬开薄膜的一角,用手轻轻将透明的薄膜取下,用滤纸吸干所有的水分,最后将薄膜置液体石蜡中浸泡3min,再用滤纸吸干液体石蜡,压平。此薄膜透明,区带着色清晰,可用于光吸收计扫描。长期保存不褪色。6、定量(1)浸泡 将膜片上的各蛋白质分离区带分段剪下,分别置于相应的标有编号的试管内,然后各加入0.4mol/L的氢氧化钠溶液进行浸泡。浸泡淡色带所加入的0.4mol/L氢氧化钠溶液的量为4ml,深色带为8ml
抗体 混合,直接孵育,这样可节省重复染色过程所需要的时间,并可减少重复染色带来的污染。 理想的染色结果应背景清洁,金颗粒集中在抗原抗体反应部位。欲获得最佳染色,实验中需注意: ①用高特异性和高亲和力抗体; ②被检组织细胞需含一定量抗原,如抗原太少,则难以被抗体标记; ③漂洗是否彻底是决定实验成功的关键因素之一; ④实验所用各种液体可用0.22um微孔滤器(minipore filter)滤过,各种器皿应清洁。 胶体金标抗体双重染色法电镜
物很充足时,它们会全部占据抗体结合部位、这会阻止有色微小颗粒和膜上试验探极区相结合.这样阳性尿样在试验区就不会出现沉淀色带.试纸上另一条对照色带是另一处抗体反应区,它表明试验是可靠的.在作试验结果判断前,对照色带总是应该出现的.一般情况下,阴性结果是出现两条色带:一条为对照色带,在试验区还出现一条色带沉淀线,而阳性结果只出现一条色带。 市面上大量使用的早早孕HCG胶体金试纸,采用了双抗体夹心法的检测模式.阳性尿样是双红线,阴性尿样是单红线、人体绒毛膜促性腺激素(HCG)的含量是衡量怀孕
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