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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
有效期1年
- 英文名:
Annexin V-YSFluor 647/PI Apoptosis Detection Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20 ℃避光长期保存,避免反复冻融,一年有效。
- 规格:
20T(40304ES20)/50T(40304ES50)/100T(40304ES60)
| 规格: | 20T(40304ES20) | 产品价格: | ¥518.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50T(40304ES50) | 产品价格: | ¥1120.00 |
| 规格: | 100T(40304ES60) | 产品价格: | ¥1960.00 |
产品描述
Annexin V-Alexa Fluor647/PI细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor647/PI Apoptosis Detection Kit)是用Alexa Fluor647标记了的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生,可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。
其检测原理为:在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin V(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
另外,本试剂盒中还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Alexa Fluor647 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。
本试剂盒需要使用流式细胞仪进行检测。
产品组分

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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 | ||
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40304ES20 (20T) |
40304ES50 (50T) |
40304ES60 (100T) | ||
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40304-A |
Annexin V-Alexa Fluor647 |
100 μL |
250 μL |
500 μL |
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40304-B |
PI Staining Solution (20 μg/mL) |
200 μL |
500 μL |
1.0 mL |
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40304-C |
1×Binding Buffer |
10 mL |
25 mL |
50 mL |
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。-20 ℃避光保存,避免反复冻融,一年有效期。
【注】:如果需要在短时间内多次重复使用,可以在4 ℃避光保存,半年有效期。
注意事项
1、由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2、对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-Alexa Fluor647的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3、如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
4、试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
5、Annexin V-Alexa Fluor647和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、本产品仅作科研用途!
使用说明
1、 样品染色
1.1、悬浮细胞:300 g,4℃离心5 min收集细胞。
贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化后,300 g,4℃离心5 min收集细胞。胰酶消化时间不宜过长,以防引起假阳性。1.2、用预冷的PBS洗涤细胞2次,每次均需300g,4℃离心5 min。
1.3、吸弃PBS,加入100 μL 1×Binding Buffer重悬细胞。
1.4、加入5μL Annexin V-Alexa Fluor 647和10 μL PI,轻轻混匀。
1.5、避光、室温反应15 min。
1.6、加入400 μL 1×Binding Buffer,混匀后放置于冰上,样品在1小时内用流式细胞仪或荧光显微镜检测。
【注】:为了避免洗涤细胞时损失细胞,在吸液时可以用大的Tip头套上小的Tip头吸液。
2、流式细胞仪分析
Alexa Fluor647最大激发波长为651 nm,最大发射波长为667 nm;PI-DNA复合物的最大激发波长为535 nm,最大发射波长为615 nm。用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),Alexa Fluor647为横坐标,PI为纵坐标。每个样采集10,000 events。
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货号 |
品名 |
规格 |
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40302ES20 |
Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit |
20T |
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40302ES50 |
50T | |
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40302ES60 |
100T | |
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40303ES20 |
Annexin V-EGFP/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit |
20T |
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40303ES50 |
50T | |
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40303ES60 |
100T | |
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40304ES20 |
Annexin V-Alexa Fluor 647/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-Alexa Fluor 647/PI Apoptosis Detection Kit |
20T |
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40304ES50 |
50T | |
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40304ES60 |
100T | |
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40305ES20 |
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20T |
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40305ES50 |
50T | |
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40305ES60 |
100T | |
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40310ES20 |
Annexin V-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit |
20T |
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40310ES50 |
50T | |
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40310ES60 |
100T |
HB220222
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- 作者
- 内容
- 询问日期
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