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文献和实验1/3~1/5的膜;透过目标物,孔径应选5-10倍的膜。 【求助】准备用millipore 的超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白,在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子,但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是Amicon Ultra 15ml规格的管子,不知道有没有谁以前做过的,有关于转速,时间给一些建议,另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理?离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失?如果要把管子重复利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是将其浸到乙醇中防于4度,还是在管子中灌入
) 。 ( 2 ) WGA 缓冲液:20 mmol/L Tris - HCl,pH 7.8 , 含 150 mmol/L KCl,2 mmol/L CaCl2,10 mmol/L MgCl2,1 mmol/L 二硫苏糖(DTT ) 和蛋白酶抑制剂。 ( 3 ) 鸡尾酒蛋白酶抑制剂(Roche Applied Science) ( 保存于 4°C ) 。 ( 4 ) Amicon Bioseparation YM-10 离心超滤管(Millipore, Saint Quentin en Yve
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